Aislamiento de microorganismos productores de biosurfactantes y lipasas a partir de efluentes residuales de camales y suelos contaminados con hidrocarburos
DOI:
https://doi.org/10.17268/sci.agropecu.2016.01.03Palavras-chave:
microorganismos productores de biosurfactantes, secuenciamiento de AND, efluentes residualesResumo
Los biosurfactantes son moléculas anfipáticas que reducen la tensión en la interfase, incrementando así la solubilidad en agua y disponibilidad de compuestos orgánicos, son producidos por bacterias, hongos, y levaduras. Para el aislamiento de bacterias productoras de biosurfactante y lipasas, se sembró en medios inductores 10% de efluentes residuales procedentes de camales y suelos de grifos contaminados con hidrocarburos de la Provincia de Trujillo - Perú. Los cultivos aislados se sembraron en agar lecitina y agar rodamina para la determinación de productores de lipasas. Los microorganismos seleccionados se sembraron en agar sangre y agar Siegmund y Wagner (SW) para la selección preliminar de bacterias biosurfactantes. Posteriormente se determinó a aquellos microorganismos productores de surfactantes mediante Índice de Emulsificación (IE) y Medición de la Tensión superficial. Los cultivos positivos a estas pruebas fueron seleccionados e identificados mediante galerías API e identificación molecular por secuenciamiento de ADN. Los cultivos que redujeron en mayor medida la tensión superficial fueron P. aeruginosa y B. amyloliquefaciens, llegando a reducir la tensión superficial a 27,2 ± 0,4 y 31,03 ± 0,4 mN/m respectivamente, mientras que P. stutzeri y Pseudomonas sp. redujeron la tensión superficial a 48,3 y 52,6 ± 0,4 mN/m respectivamente. Se concluye, por tanto, que se obtuvo 49 cultivos productores de lipasas de la provincia de Trujillo, de los cuales se determinó que Pseudomonas stutzeri, Pseudomonas sp, Pseudomonas aeruginosa y Bacillus amyloliquefaciens son productores de biosurfactantes y pueden aplicarse en el área de la biotecnología ambiental para la remoción y biodegradación de contaminantes.Referências
Bodour, A; Maier, R. 2002. Biosurfactants: types, screening methods, and applications, p. 750-770. In G. Bitton (ed.), Encyclopedia of environmental microbiology, 1st ed. John Wiley and Sons, Inc., Hoboken, N.J.
Bodour, A.; Drees, K.; Maier, R. 2003. Distribution of Biosurfactant-Producing Bacteria in Undisturbed and Contaminated Arid Southwestern Soils. Applied and Environmental Microbiology 69(6): 3280-87.
Bouchotroch, S.; Quesada, E.; Izquierdo, I.; Rodriguez, M.; Béjar. V. 2000. Bacterial exopolysaccharides produced by newly discovered bacteria belonging to the genus Halomonas, isolated from hypersaline habitats in Morocco. J. Ind. Microbiol. Biotechnol 24:374-378.
Camilios, D.; Meira, J.; de Araújo, J.; Mitchell, D.; Krieger, N. 2008. Optimization of the production of rhamnolipids by Pseudomonas aeruginosa UFPEDA 614 in solid-state culture. Appl Microbiol Biotechnol 81(3): 441-8
Cortés-Camargo, S.; Barragán-Huerta, B. 2013. Producción de biosurfactantes por microorganismos halófilos. Revista Sistemas Ambientales 6(1): 1-8.
Costa, S.; Nitschke, M.; Haddad. R.; Eberlin, M.; Contiero, J. 2006. Production of Pseudomonas aeruginosa LBI rhamnolipids following growth on Brazilian native oils. Process Biochem 41:483–488.
Deziel, E.; Lepine, F.; Milot S.; Villemur. R. 2000. Mass spectrometry monitoring of rhamnolipids from a growing culture of Pseudomonas aeruginosa strain 57RP. Biochim Biophys Acta 1485 (2-3): 145-152.
Henriksen, A.; Anthoni, U.; Nielsen, T.; Sørensen, J.; Christophersen, C.; Gajhede, M. 2000. Cyclic lipoundecapeptide tension from Pseudomonas fluorescens strain 96.578. Acta Crystallogr C 56:113-115.
Hubert, C.; Shen, Y.; Voordouw, G. 1999. Composition of toluene degrading microbial communities from soil at different concentrations of toluene. Appl. Environ. Microbiol 65 (7): 3064 70.
Isken, S.; Derks, A.; Wolffs, P.; de Bont, J. 1999. Effect of organic solvents on the yield of solvent tolerant Pseudomonas putida S12. Appl. Environ. Microbiol 65 (6): 2631-35.
Jain, D.; Collins-Thompson, D.; Lee, H.; Trevors, J.T. 1991. A drop-collapsing test for screening surfactant-producing microorganisms. J Microbiol Methods 13(4): 271–279.
Jiménez, D.; Medina, S.; Gracida, J. 2010. Propiedades, aplicaciones y producción de biotensoactivos. Rev. Int. Contam. Ambient 26(1): 65-84.
Karanth, N.; Deo, P.; Veenanadig, N. 1999. Microbial production of biosurfactants and their importance. Curr Sci 77: 116–126.
Maier, R.; Soberón-Chávez, G. 2000. Pseudomonas aeruginosa rhamnolipids: biosynthesis and potential environmental applications. Appl. Microbiol. Biotechnol 54: 625-633.
Mulligan, C.; Cooper, D.; Neufeld, R. 1984. Selection of microbes producing biosurfactants in media without hydrocarbons. J Fermentation Technol 62(4): 311–314.
Mulligan, C. 2005. Environmental application for biosurfactants. Environ Pollut 133:183–198.
Ochoa-Loza, F. 1998. Physico-chemical factors affecting rhamnolipid (biosurfactant) application for removal of metal contaminants from soil. Ph.D. dissertation. University of Arizona, Tucson.
Plaza, G.; Zjawiony, I.; Banat, I. 2006. Use of different methods for detection of thermophilic biosurfactant-producing bacteria from hydrocarbon-contaminated bioremediated soils. J Petro Science Eng 50(1): 71–77.
Rigo, E. 2004. Aplicação de lipases como auxiliary no pré-tratamento de efluentes de frigoríficos de suínos e bovinos. Dissertação (Maestría), URI, Erechim. RS.
Schulz, D.; Passeri, A.; Schmidt, M.; Lang, S.; Wagner, F.; Wray, V.; Gunkel, W. 1991. Marine biosurfactants. 1. Screening for biosurfactants among crude-oil degrading marine microorganisms from the North-Sea. Z Naturforsch 46(3-4): 197–203.
Siegmund, I.; Wagner, F. 1991. New method for detecting rhamnolipids excreted by Pseudomonas Swinburne species during growth on mineral agar. Biotechnol. Tech 5: 265 -268.
Stoyanov, S.; Rehage, H.; Paunov, V. 2003. Novel surface tensión isotherm for surfactans based on local density functional theory. Phys. Rev. Lett 91(8): 86-102.
Tuleva, B.; Ivanov, G.; Christova, N. 2002. Biosurfactant production by a new Pseudomonas putida strain. Z. Naturforsch 57: 356-360.
Yañez-Ocampo, G.; Wong-Villarreal, A. 2013. Biosurfactantes Microbianos, Producción Potencial con Residuos Agroindustriales de Chiapas. Bio Tecnología 17(3): 12-28.
Youssef, N.; Duncan, K.; Nagle, D.; Savage, K.; Knapp, R.; McInerney, M. 2004. Comparison of methods to detect biosurfactant production by diverse microorganisms. J Microbiol Methods 56(3): 339–347.
Zhang, Y.; Miller, R. 1995. Effect of rhamnolipid (biosurfactant) structure on solubilization and biodegradation of n-alkanes. Appl. Environ. Microbiol 61: 2247-2251.
Zhang, Y.; Maier, W.; Miller, R. 1997. Effects of rhamnolipids on the dissolution, bioavailability, and biodegradation of phenanthrene. Environ. Sci. Technol 31: 2211-2217.
Received July 16, 2014.
Accepted March 14, 2016.
* Corresponding author
E-mail: lizzie_karen@hotmail.com (L. Becerra).
Publicado
Como Citar
Edição
Seção
Licença
Los autores que publican en esta revista aceptan los siguientes términos:
a. Los autores conservan los derechos de autor y conceden a la revista el derecho publicación, simultáneamente licenciada bajo una licencia de Creative Commons que permite a otros compartir el trabajo, pero citando la publicación inicial en esta revista.
b. Los autores pueden celebrar acuerdos contractuales adicionales separados para la distribución no exclusiva de la versión publicada de la obra de la revista (por ejemplo, publicarla en un repositorio institucional o publicarla en un libro), pero citando la publicación inicial en esta revista.
c. Se permite y anima a los autores a publicar su trabajo en línea (por ejemplo, en repositorios institucionales o en su sitio web) antes y durante el proceso de presentación, ya que puede conducir a intercambios productivos, así como una mayor citación del trabajo publicado (ver efecto del acceso abierto).