Antígenos de excreción-secreción de las formas adultas de Toxocara canis detectados por Western Blot utilizando anticuerpos específicos producidos en conejo
Resumen
Se determinó a los antígenos de excreción-secreción (AE/S) de la formas adultas de Toxocara canis mediante la técnica
de “Western blot” utilizando anticuerpos específicos producidos en conejo, Oryctolagus cuniculus, raza Neozelandesa
inmunizado experimentalmente. Para ello, formas adultas vivas de T. canis fueron recolectadas del intestino delgado de
cachorros de Canis familiaris infectados naturalmente, lavadas con PBS y cultivadas en medio mínimo esencial (Minium
Essential Media –MEM Eagle- BioRad) durante 18, 20, 22 y 24 horas para obtener los productos de excreción-secreción
que contengan a los antígenos. Los anticuerpos específicos, por su parte, fueron obtenidos en los conejos por inoculación,
vía subcutánea, de 101.0 ug/mL de productos excretados-secretados obtenidos a las 18, 22 y 24 horas de cultivo, según
esquemas previamente establecidos.
Mediante la técnica de “Western blot”, se detectaron cinco bandas antigénicas inmunodominantes cuyos pesos
moleculares, en Kilodaltons (KDa), fueron: 79.4, 70.8, 32.1, 31.6 y 28.2 kDa, de los cuales las tres últimas han sido
también halladas en las larvas infectivas, por lo que podrían utilizarse en el diagnóstico de la toxocarosis humana.
Palabras clave: Toxocara canis, Western blot, antígenos de exceción-secreción, Canis familiaris
Citas
Archelli, S. & L. Kozubsky. 2008. Toxocara
y Toxocariosis. Acta bioquím. clín.
latinoam., 42(3), 379-384.
Schaller, LG; FS Cuba; J Breña-Chávez; D
Toorejon & C Maguiña. 2007. Relación
entre toxocariosis y asma: estudio
prospectivo en niños del Hospital Nacional
Cayetano Heredia, Lima, Perú. Acta Med
Per 24(2):81-90
Lee, S-U; J-R Yu & S Huh. 2009.
Ultrastructural localization of Toxocara
canis larval antigen reacted with
seropositive human serum. Korean J
Parasitol, 47(1):65-68
Despommier, D. 2003. Toxocariasis:
clinical aspects, epidemiology, medical
ecology, and molecular aspects. Clin
Microbiol Rev, 16(2):265-272
Ugbomoiko, US; L Ariza & J Heukelbach.
Parasites of importance for human
health in Nigerian dogs: high prevalence
and limit knowledge of pet owners. BMC
Vet Res, 4:49
Terrones-Campos C, Andrade T, LAchira
A, Valladolid O, Lanata CF. Toxocariosis
atípica: reporte de un caso en la costa
noerte del Perú. Rev Peru Med Exp Salud
Publica 2010; 27(1):138-141
Chung, L-Y; B-H Fang; J-H Chang; S-M
Chye & C-M Yen. 2004. The infectivity and
antigenicity of Toxocara canis eggs can be
retained after long-term preservation. Ann
Trop Med & Parasit, 98(3):251-260
Sowemimo, OA. 2007. Prevalence and
intensity of Toxocara canis (Werner, 1782)
in dogs and its potential public health
significance in Ile-Ife, Nigeria. J
Helminthol.. 81:433-438
Mgnaval JF, Glikman LT, Dorchiis P,
Morassin B, Highlights of human
toxocariosis. Korean J Parasit 2001; 39:111
Espinoza, Y; P Huapaya; R Suárez; V
Chávez; C Sevilla; E Dávila & et al. 2003.
Estandarización de la técnica de ELISA
para el diagnóstico de la toxocariosis
humana. Ann Fac Med, 64(1):7-12
Espinoza, Y; P Huapaya; C Sevilla; A
Huiza S Jiménez & C Náquira. 2003.
Toxocariosis humana: seroprevalencia en
población de Lima mediante la técnica de
ELISA. Ann Fac Med, 64(4):228-232
Roldán, W; Y Espinoza; A Atúncar; E
Ortega; A Martínez & M Saravia. 2008.
Frequency of eosinophilia and risk factors
and their association with Toxocara
infection in schoolchildren during a health
survey in the North of Lima. Rev Inst Med
trop S Paulo, 50(5):273-278
Espinoza, Y; P Huapaya; W Roldán; S
Jiménez; Z Arce & E López. 2008. Clinical
and serological evidence of Toxocara
infection in school children from Morrope
District, Lambayeque, Peru. Rev Inst Med
trop S Paulo, 50(2):101-105
Roldán, W; Y Espinoza; P Huapaya; A
Huiza; C Sevilla & S Jiménez. 2009.
Frequency of human toxocariasis in a rural
population from Cajamarca, Peru
determined by Dot-ELISA Test. Rev Inst
Med trop S Paulo, 51(2):67-71
Espinoza YA, Huapaya PE, Roldán WR,
Jiménez S, Abanto EP, Rojas CA et al.
Seroprevalence of human toxocariasis in
andean communities from the northeast of
Lima, Peru. Rev. Inst. Med. Trop. S. Paulo
; 52(1):31-36
Roldán WH, Cavero YA, Espinoza YA,
Jiménez S, Gutiérrez CA. Human
toxocariasis: a seroepidemiological Surrey
in the Amazonian City of Yurimaguas,
Peru. Rev. Inst. Med. Trop. S. Paulo 2010;
(1):37-42
Espinoza, Y; P Huapaya; C Ayllón; C
Sevilla; A Huiza & S Jiménez. 2003.
Toxocariosis humana en pacientes con
lesión ocular. Ann Fac Med, 64(4):247-251
Iddawela, RD; RPVJ Rajapakse; NAND
Perera & T Agatsuma. 2007.
Characterization of a Toxocara canis
specie-specific excretory-secretory antigen
(TcES-57) and development of a double
sandwich ELISA for diagnosis of visceral
larva migrans. Korean J Parasit, 45(1):1926
Hassanain NA, Mahmoud MS.
Serodiagnosis of human toxocariasis using
adult somatic antigens of Toxocara canis.
Res J Parasitol 2008; 3(3):85-91
Roldán WH, Espinoza YA. Evaluation o an
enzyme-linked immunoelectrotrnsfer blot
test for the confirmatory serodiagnosis of
human toxocarosis. Mem Inst Oswaldo
Cruz 2009; 104(3):411-418
Fogt-Wyrwas, R; W Jaosz & H MizgajskaWiktor.
Utilizing a polymerase chain
reaction method for the detection of
Toxocara canis and T. cati eggs in soil. J
Helminthol, 81:75-78
Escalante, H; E Miranda; M Lorca; M
Verástegui & P Torres. 1995. La técnica
de “Western blot” con antígenos de fluido
vesicular de Cysticercus celluloseae para
el diagnóstico de la cisticercosis. Boletin
Peruano de Parasitologia 11:26-31
Escalante, H; K Davelois & P Torres.
Antígenos específicos de Taenia
solium detectados por “Western Blot”
usando sueros de pacientes con
parasitosis confirmada. SCIENDO, 2(12):33-39
Ramírez, LA. 2002. Antígenos de
escreción/secreción de Ascaris
lumbricoides var suum detectados por
“Western blot” usando suero de
Oryctolagus cuniculus “conejo” inmunizado
experimentalmente. Tesis Bachiller
Facultad de Ciencias Biológicas.
Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo.
Perú.
Jara, CA; H Escalante; E Díaz-Limay & W
Reyes-Vega. 2003. Antígenos de
excreción/secreción de geohelmintos
parásitos del hombre productores de
anticuerpos policlonales IgG. SCIENDO,
(1-2):81-87
Vilela-Alburqueque, M. 2007. Sensibilidad
y especificidad de la técnica de “Western
blot” para el diagnóstico de la
estrongyloidiasis humana usando
antígenos de excreción/secreción de
larvas filariformes de Strongyloides
stercoralis. Tesis Bachiller Facultad de
Ciencias Biológicas. Universidad Nacional
de Trujillo. Trujillo. Perú.
Jara CA. La técnica de Western blot con
antígeno larvario de Toxocara canis para
el diagnóstico de la toxocariosis. Tesis
Maestría. Escuela de Postgrado de la
Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo.
Perú.
Ramírez-Zapata. MR. 2004. Antígenos de
excreción/secreción de la larva 3 de
Toxocara canis detectados mediante la
técnica de “Western blot” usando suero de
Oryctolagus cunniculus “conejo”
inmunizado experimentalmente. Tesis
Bachiller Facultad de Ciencias Biológicas.
Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo.
Perú.
Castro-Sesquen, YE. 2006. Antígenos de
larvas infectivas y titulares de Toxocara
canis evaluados mediante
electroinmunotransferencia con
anticuerpos de Oryctolagus cuniculus y de
humanos. Tesis Bachiller Facultad de
Ciencias Biológicas. Universidad Nacional
de Trujillo. Trujillo. Perú.
Bradford MM. A rapid ans sensitive
method for quantification of microgram
quantities of protein utilizing the principle
of protein dye binding. Annal Biochem
; 72:248-254
Magnaval, J; R Fabre; P Maurieres; J
Charlet & B de Larrard. 1991. Application
of the western blotting procedure for the
immunodiagnosis of human toxocariosis.
Parasitol Res, 77(8):697-702.
Chávez, F; O Vásquez & H Escalante.
Evaluación de la técnica Western
blot para la detección de antígenos de
Hymenolepis nana. Rev peru biol, 14(2):
-286
Suzuki, LA; GC Arruda, EMAB Quagliato &
CL Rossi. 2004. Evaluation of Taenia
solium and Taenia crassiceps cysticercal
antigens for immunodiagnosis of
neurocisticercosis using ELISA on
cereborspinal fluid simples. Rev Soc Bras
Med Trop. 40(2):152-155
Trillo-Altamirano, M; JA Carrasco & R
Cabrera. 2003. Prevalencia de helmintos
enteroparásitos zoonóticos y factores
asociados en Canis familiaris en una zona
urbana de la ciudad de Ica, Perú. Parasitol
Latinoam, 58:136-141
Vidal, S & U Vergara. 1995. Diagnóstico
serológico de toxocariasis humana:
comparación de los antígenos de
excreción/secreción y antígeno larval
somático de Toxocara canis. Immunol,
(4):166-172.
. Zevallos-Lescano, S; PP Chieffi; BA
Peres; E O de Mello; C Náquira-Velarde, A
Apaza-Salinas; et al. 1998. Soil
contamination and human infection by
Toxocara sp. in the Urban Area of Lima,
Peru. Mem Inst Oswaldo Cruz, 93(6):733734