Antígenos de excreción-secreción de las formas adultas de Toxocara canis detectados por Western Blot utilizando anticuerpos específicos producidos en conejo

Autores/as

  • Mirtha Chuyo Zavaleta Universidad Nacional de Trujillo.
  • Cesar Jara Campos Universidad nacional de Trujillo

Resumen

 

Se determinó a los antígenos de excreción-secreción (AE/S) de la formas adultas de Toxocara canis mediante la técnica
de “Western blot” utilizando anticuerpos específicos producidos en conejo, Oryctolagus cuniculus, raza Neozelandesa
inmunizado experimentalmente. Para ello, formas adultas vivas de T. canis fueron recolectadas del intestino delgado de
cachorros de Canis familiaris infectados naturalmente, lavadas con PBS y cultivadas en medio mínimo esencial (Minium
Essential Media –MEM Eagle- BioRad) durante 18, 20, 22 y 24 horas para obtener los productos de excreción-secreción
que contengan a los antígenos. Los anticuerpos específicos, por su parte, fueron obtenidos en los conejos por inoculación,
vía subcutánea, de 101.0 ug/mL de productos excretados-secretados obtenidos a las 18, 22 y 24 horas de cultivo, según
esquemas previamente establecidos.
Mediante la técnica de “Western blot”, se detectaron cinco bandas antigénicas inmunodominantes cuyos pesos
moleculares, en Kilodaltons (KDa), fueron: 79.4, 70.8, 32.1, 31.6 y 28.2 kDa, de los cuales las tres últimas han sido
también halladas en las larvas infectivas, por lo que podrían utilizarse en el diagnóstico de la toxocarosis humana.
Palabras clave: Toxocara canis, Western blot, antígenos de exceción-secreción, Canis familiaris

Biografía del autor/a

Mirtha Chuyo Zavaleta, Universidad Nacional de Trujillo.

Exalumna de la EAP de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, Departamento de microbiología y Parasitología

Cesar Jara Campos, Universidad nacional de Trujillo

Profesor del Departamento de Microbiología y Parasitología de la Universidad nacional de Trujillo-Perú

Citas

Archelli, S. & L. Kozubsky. 2008. Toxocara

y Toxocariosis. Acta bioquím. clín.

latinoam., 42(3), 379-384.

Schaller, LG; FS Cuba; J Breña-Chávez; D

Toorejon & C Maguiña. 2007. Relación

entre toxocariosis y asma: estudio

prospectivo en niños del Hospital Nacional

Cayetano Heredia, Lima, Perú. Acta Med

Per 24(2):81-90

Lee, S-U; J-R Yu & S Huh. 2009.

Ultrastructural localization of Toxocara

canis larval antigen reacted with

seropositive human serum. Korean J

Parasitol, 47(1):65-68

Despommier, D. 2003. Toxocariasis:

clinical aspects, epidemiology, medical

ecology, and molecular aspects. Clin

Microbiol Rev, 16(2):265-272

Ugbomoiko, US; L Ariza & J Heukelbach.

Parasites of importance for human

health in Nigerian dogs: high prevalence

and limit knowledge of pet owners. BMC

Vet Res, 4:49

Terrones-Campos C, Andrade T, LAchira

A, Valladolid O, Lanata CF. Toxocariosis

atípica: reporte de un caso en la costa

noerte del Perú. Rev Peru Med Exp Salud

Publica 2010; 27(1):138-141

Chung, L-Y; B-H Fang; J-H Chang; S-M

Chye & C-M Yen. 2004. The infectivity and

antigenicity of Toxocara canis eggs can be

retained after long-term preservation. Ann

Trop Med & Parasit, 98(3):251-260

Sowemimo, OA. 2007. Prevalence and

intensity of Toxocara canis (Werner, 1782)

in dogs and its potential public health

significance in Ile-Ife, Nigeria. J

Helminthol.. 81:433-438

Mgnaval JF, Glikman LT, Dorchiis P,

Morassin B, Highlights of human

toxocariosis. Korean J Parasit 2001; 39:111

Espinoza, Y; P Huapaya; R Suárez; V

Chávez; C Sevilla; E Dávila & et al. 2003.

Estandarización de la técnica de ELISA

para el diagnóstico de la toxocariosis

humana. Ann Fac Med, 64(1):7-12

Espinoza, Y; P Huapaya; C Sevilla; A

Huiza S Jiménez & C Náquira. 2003.

Toxocariosis humana: seroprevalencia en

población de Lima mediante la técnica de

ELISA. Ann Fac Med, 64(4):228-232

Roldán, W; Y Espinoza; A Atúncar; E

Ortega; A Martínez & M Saravia. 2008.

Frequency of eosinophilia and risk factors

and their association with Toxocara

infection in schoolchildren during a health

survey in the North of Lima. Rev Inst Med

trop S Paulo, 50(5):273-278

Espinoza, Y; P Huapaya; W Roldán; S

Jiménez; Z Arce & E López. 2008. Clinical

and serological evidence of Toxocara

infection in school children from Morrope

District, Lambayeque, Peru. Rev Inst Med

trop S Paulo, 50(2):101-105

Roldán, W; Y Espinoza; P Huapaya; A

Huiza; C Sevilla & S Jiménez. 2009.

Frequency of human toxocariasis in a rural

population from Cajamarca, Peru

determined by Dot-ELISA Test. Rev Inst

Med trop S Paulo, 51(2):67-71

Espinoza YA, Huapaya PE, Roldán WR,

Jiménez S, Abanto EP, Rojas CA et al.

Seroprevalence of human toxocariasis in

andean communities from the northeast of

Lima, Peru. Rev. Inst. Med. Trop. S. Paulo

; 52(1):31-36

Roldán WH, Cavero YA, Espinoza YA,

Jiménez S, Gutiérrez CA. Human

toxocariasis: a seroepidemiological Surrey

in the Amazonian City of Yurimaguas,

Peru. Rev. Inst. Med. Trop. S. Paulo 2010;

(1):37-42

Espinoza, Y; P Huapaya; C Ayllón; C

Sevilla; A Huiza & S Jiménez. 2003.

Toxocariosis humana en pacientes con

lesión ocular. Ann Fac Med, 64(4):247-251

Iddawela, RD; RPVJ Rajapakse; NAND

Perera & T Agatsuma. 2007.

Characterization of a Toxocara canis

specie-specific excretory-secretory antigen

(TcES-57) and development of a double

sandwich ELISA for diagnosis of visceral

larva migrans. Korean J Parasit, 45(1):1926

Hassanain NA, Mahmoud MS.

Serodiagnosis of human toxocariasis using

adult somatic antigens of Toxocara canis.

Res J Parasitol 2008; 3(3):85-91

Roldán WH, Espinoza YA. Evaluation o an

enzyme-linked immunoelectrotrnsfer blot

test for the confirmatory serodiagnosis of

human toxocarosis. Mem Inst Oswaldo

Cruz 2009; 104(3):411-418

Fogt-Wyrwas, R; W Jaosz & H MizgajskaWiktor.

Utilizing a polymerase chain

reaction method for the detection of

Toxocara canis and T. cati eggs in soil. J

Helminthol, 81:75-78

Escalante, H; E Miranda; M Lorca; M

Verástegui & P Torres. 1995. La técnica

de “Western blot” con antígenos de fluido

vesicular de Cysticercus celluloseae para

el diagnóstico de la cisticercosis. Boletin

Peruano de Parasitologia 11:26-31

Escalante, H; K Davelois & P Torres.

Antígenos específicos de Taenia

solium detectados por “Western Blot”

usando sueros de pacientes con

parasitosis confirmada. SCIENDO, 2(12):33-39

Ramírez, LA. 2002. Antígenos de

escreción/secreción de Ascaris

lumbricoides var suum detectados por

“Western blot” usando suero de

Oryctolagus cuniculus “conejo” inmunizado

experimentalmente. Tesis Bachiller

Facultad de Ciencias Biológicas.

Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo.

Perú.

Jara, CA; H Escalante; E Díaz-Limay & W

Reyes-Vega. 2003. Antígenos de

excreción/secreción de geohelmintos

parásitos del hombre productores de

anticuerpos policlonales IgG. SCIENDO,

(1-2):81-87

Vilela-Alburqueque, M. 2007. Sensibilidad

y especificidad de la técnica de “Western

blot” para el diagnóstico de la

estrongyloidiasis humana usando

antígenos de excreción/secreción de

larvas filariformes de Strongyloides

stercoralis. Tesis Bachiller Facultad de

Ciencias Biológicas. Universidad Nacional

de Trujillo. Trujillo. Perú.

Jara CA. La técnica de Western blot con

antígeno larvario de Toxocara canis para

el diagnóstico de la toxocariosis. Tesis

Maestría. Escuela de Postgrado de la

Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo.

Perú.

Ramírez-Zapata. MR. 2004. Antígenos de

excreción/secreción de la larva 3 de

Toxocara canis detectados mediante la

técnica de “Western blot” usando suero de

Oryctolagus cunniculus “conejo”

inmunizado experimentalmente. Tesis

Bachiller Facultad de Ciencias Biológicas.

Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo.

Perú.

Castro-Sesquen, YE. 2006. Antígenos de

larvas infectivas y titulares de Toxocara

canis evaluados mediante

electroinmunotransferencia con

anticuerpos de Oryctolagus cuniculus y de

humanos. Tesis Bachiller Facultad de

Ciencias Biológicas. Universidad Nacional

de Trujillo. Trujillo. Perú.

Bradford MM. A rapid ans sensitive

method for quantification of microgram

quantities of protein utilizing the principle

of protein dye binding. Annal Biochem

; 72:248-254

Magnaval, J; R Fabre; P Maurieres; J

Charlet & B de Larrard. 1991. Application

of the western blotting procedure for the

immunodiagnosis of human toxocariosis.

Parasitol Res, 77(8):697-702.

Chávez, F; O Vásquez & H Escalante.

Evaluación de la técnica Western

blot para la detección de antígenos de

Hymenolepis nana. Rev peru biol, 14(2):

-286

Suzuki, LA; GC Arruda, EMAB Quagliato &

CL Rossi. 2004. Evaluation of Taenia

solium and Taenia crassiceps cysticercal

antigens for immunodiagnosis of

neurocisticercosis using ELISA on

cereborspinal fluid simples. Rev Soc Bras

Med Trop. 40(2):152-155

Trillo-Altamirano, M; JA Carrasco & R

Cabrera. 2003. Prevalencia de helmintos

enteroparásitos zoonóticos y factores

asociados en Canis familiaris en una zona

urbana de la ciudad de Ica, Perú. Parasitol

Latinoam, 58:136-141

Vidal, S & U Vergara. 1995. Diagnóstico

serológico de toxocariasis humana:

comparación de los antígenos de

excreción/secreción y antígeno larval

somático de Toxocara canis. Immunol,

(4):166-172.

. Zevallos-Lescano, S; PP Chieffi; BA

Peres; E O de Mello; C Náquira-Velarde, A

Apaza-Salinas; et al. 1998. Soil

contamination and human infection by

Toxocara sp. in the Urban Area of Lima,

Peru. Mem Inst Oswaldo Cruz, 93(6):733734

Descargas

Publicado

2013-10-03

Número

Sección

Artículos Originales