CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE Azospirillum sp., Azotobacter sp. Y Pseudomonas sp. PROMOTORAS DEL CRECIMIENTO VEGETAL DE CULTIVOS DE Solanum tuberosum y Zea mays

Authors

  • Román Cabello Instituto de Biotecnología e Ingeniería Genética, Universidad Nacional del Centro del Perú
  • Mamani Gamarra Instituto de Biotecnología e Ingeniería Genética, Universidad Nacional del Centro del Perú
  • D. García Ventocilla Instituto de Biotecnología e Ingeniería Genética, Universidad Nacional del Centro del Perú

Abstract

Con el objetivo de generar un banco autóctono con bacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR) y su posterior utilización como inoculantes del suelo que disminuyan la fertilización química, se tomaron muestras de raíces de cultivos de papa (Solanum tuberosum Var Canchan) y de maíz (Zea mayz Var Blanco mejorado) tratados con cinco tipos de abonamiento: estiércol de ovino, cuy y vacuno, fertilización química y sin fertilizante, de las cuales se aislaron cepas de bacterias nitrificantes correspondientes a los géneros Azospirillum, Azotobacter y Pseudomonas. Las bacterias fueron diferenciadas en base a su morfología, poder generador de auxinas, solubilización de fosfatos, reacción a la catalasa, oxidasa y similaridad genética previa amplificación de la región del mRNA 16S. Los resultados muestran una amplia base genética que necesita ser caracterizada e identificada exhaustivamente. La producción de AIA en Azospirillum llegó hasta niveles de 120 ppm; 118 ppm para el género Azotobacter y 115 ppm en Pseudomonas fluorescens. De cepas seleccionadas, el DNA fue secuenciado, comparado con la Base de Datos del GenBank  e identificadas hasta especie, tales como Azospirillum brasilense; Azotobacter vinelandiiA. choccrococum, A. nigricans y A. salinestris. Las secuencias amplificadas con los primer universales 9-27F y 1542R para las cepas de Azospirillum, Azotobacter y Pseudomonas fluorescens utilizados para este estudio no están reportados en la base de datos del GenBank.

 

Palabras clave: Bacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR), Azospirillum sp, Azotobacter sp, Pseudomonas fluorescens, Acido Indol Acético, Solubilización de fosfatos.

ABSTRACT

With the aim of generating a native bank with Promoting Grow Plant Rhizobacteria (PGPR) and their later use as inoculates of the soils that diminishes the chemical fertilization, samples were taken from roots of cultures of potato (Solanum tuberosum Var Canchan) and of maize (Zea mayz Var Improved white) dealt with five types of fertilization: ovine, bovine guinea and pig manure, chemical fertilization and without fertilizer, of which strains of nitrogen-fixing bacteria corresponding to the genera Azospirillum, Azotobacter and Pseudomonas were isolated. The bacteria were differentiated on the basis of their morphology, generating power of auxins, phosphate solubilization, reaction to the catalase, oxidasa and genetic similarity previous amplification of the region of rRNA 16S. The results show an ample genetic base that exhaustive need to be characterized and to be identified. The production of AIA in Azospirillum arrived until 120 levels of ppm; 118 ppm for the genera Azotobacter and 115 ppm in Pseudomonas fluorecens. Of selected strains, the DNA was sequenced, compared with Base of Data the GenBank and identified until species, such as Azospirillum brasilense; Azotobacter vinelandii, A. choccrococum, A. nigricans and A. salinestris. The sequences amplified with primer universal 9-27F and 1542R for the strains of Azospirillum, Azotobacter and Pseudomonas fluorescens used for this study are not reported in the data base of the GenBank.

Key words: Promoting Grow Plant Rhizobacteria (PGPR), Azospirillum sp., Azotobacter sp., Pseudomonas fluorescens, Acetic Indol Acid, phosphate solubilization.

 

References

Abbas Akbari, Gh.; A. H. Seyyed Mehdi; H.A. Alikhani, I. Allahdadi & M.H. Arzanesh. 2007. Isolation and Selection of Indigenous Azospirillum spp. and the IAA of Superior Strains Effects on Wheat Roots. World Journal of Agricultural Sciences 3 (4): 523-529.

Abril, A. 2006. Inoculación con Azospirillum spp en la región semiárida-central de Argentina: factores que afectan la colonización rizosférica, CI. Suelo (Argentina) 24 (1).

Caballero, J. 2000. El género Azospirillum. Programa de Ecología Molecular y Microbiana, Centro de Investigación sobre Fijación de Nitrógeno, UNAM, Cuernavaca, Mor., México.

Collados, C. 2006. Impacto de inoculantes basados en Azospirillum modificado genéticamente sobre la diversidad y actividad de los hongos de la micorriza arbuscular en rizósfera de trigo y maíz. Tesis Doctoral. Universidad de Granada, España. p 185.

Christiansen-Weniger, C. 1988. An influence of plant growth substances on growth and nitrogenase activity from Azospirillum brasilense. In: Azospirillum IV: Genetics, Physiology, Ecology, ed. W. Klingmüller, Berlin, Heidelberg: Springer-Verlag. pp. 141-149.

Escobar, M. 2002. Fundamentos de Microbiología .Tercera edición Centro editorial Javeriano. Colombia.

Ferrera-Cerrato, R.; A. Alarcón. 2007. Microbiología agrícola. Edit Trillas México.

Espín, Guadalupe. 2007. Biología de Azotobacter vinelandii Instituto de Biotecnología, Cap. 9. Universidad Nacional Autonoma de México.

Hafeez, F. Y; M. E. Safdar; A. U. Chaudhry & K. A. Malik. 2004. Rhizobial inoculation improves seedling emergence, nutrient uptake, and growth and cotton. Australian Journal of Experimental Agriculture 44(6) 617 – 622.

Jiménez, D. 2007. Caracterización molecular de cepas nativas colombianas de Azotobacter spp mediante el análisis de restricción del DNA ribosomal 16S. Tesis. Pontificia Universidad Javeriana Facultad de Ciencias Básicas. Bogotá, D. C. Colombia. p 105.

Lamm, R. B. & C. A. Neyra. 1981. Characterization and cyst production of azospirilla isolated from selected grasses growing in New Yersey and New York. Can. J. Microbiol. 27:1320-1325.

Peña, H. & I. Reyes. 2007. Aislamiento y evaluación de bacterias fijadoras de nitrógeno y disolventes de fosfatos en la promoción del crecimiento de la lechuga (Lactuca sativa L.). Interciencia Vol. 32 (8): 560-565

Sokal, R. R. & P. H. A. Sneath. 1963. Principles of numerical taxonomy. San Francisco: Freeman.

Reis F.; M. Silva; K. Teixeira; S. Urquiaga & V. Reis. 2004. Identifição de isolados de Azospirillum amazonense asociados a Brachiaria spp, em diferentes épocas e condições de cultivo e produção de fitormônio pela bactéria. R. Bras. Cie. Solo 28: 103-113.

Rodríguez-Cáceres, E. 1982. Improved medium for isolation of Azospirillum spp. Appl. Environ. Microbiol. 44:990-991.

Rohlf, F.J. 1997. NTSYSpc Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System, Release 2.0 Exeter Software New York.

Torres-Rubio, M. G.; S. A. Valencia-Plata; J. Bernal-Castillo; P. Martínez-Nieto. 2000. Isolation of Enterobacteria, Azotobacter sp. and Pseudomonas sp., producers of Indole-3-Acetic Acid and Siderophores, from Colombian Rice Rhizosphere Revista Latinoamericana de Microbiología 42:171-176.

Vázquez, P.; G. Holguin; M. E. Puente; A. Lopez-Cortes & Yoav Bashan. 2000. Phosphate-solubilizing microorganisms associated with the rhizosphere of mangroves in a semiarid coastal lagoon. Biology and Fertility of Soils Vol 30: 460-468

White, B. 1993. PCR protocols: Current methods and applications. Vol. 15. Humana Press, Totowa, New Jersey.

Zuno-Floriano, F. G.; P. Estrada-de los Santos; J. A. Gallegos-Infante; N. E. Rocha-Gúzman; M. L. Aldana-Madrid; G. Virgen-Calleros; M. G. Miller & C. V. Muñoz-Ruiz. 2009. Producción in vitro de plántula de papa inoculada con Pseudomonas sp. Terra Latinoamericana, 27 (3): 207-217.

Zúñiga, D. 2008. Manual de Microbiología Agrícola: Rhizobium, PGPR, indicadores de fertilidad e inocuidad. Universidad Nacional Agraria La Molina.

Published

2018-04-26

How to Cite

Cabello, R., Gamarra, M., & García Ventocilla, D. (2018). CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE Azospirillum sp., Azotobacter sp. Y Pseudomonas sp. PROMOTORAS DEL CRECIMIENTO VEGETAL DE CULTIVOS DE Solanum tuberosum y Zea mays. Sagasteguiana, 2(2), 145-156. Retrieved from https://revistas.unitru.edu.pe/index.php/REVSAGAS/article/view/1820

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ARTÍCULOS ORIGINALES