RESEARCH ARTICLE          

 

Characterization of Meloidogyne spp. and population density of phytoparasitic nematodes associated with alliaceae crops in the Arequipa region, Peru

 

Caracterización de Meloidogyne spp. y densidad poblacional de nematodos fitoparásitos asociados a cultivos de aliáceas en la región Arequipa, Perú

 

Victor Alexi Peralta-Ccayahuallpa1 ; Victor Hugo Casa-Coila1* ; Israel Lima-Medina2 ;

Luis Alberto Cuadros-Fernández1 ; Dennis Geoffrey Macedo-Valdivia1

 

1 Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa, Perú.

2 Universidad Nacional del Altiplano de Puno, Perú.

 

* Corresponding author: vcasac@unsa.edu.pe (V. H. Casa-Coila).

 

Received: 15 December 2023. Accepted: 5 May 2024. Published: 13 May 2024.

 

 

Abstract

Alliaceae crops includes several species of agricultural importance for the Arequipa region, among them the onion is the most produced in the country, however, these crops are affected by phytoparasitic nematodes, including Meloidogyne spp. which causes significant losses in the yield. The aim of the present study was to characterise the root-knot nematode (Meloidogyne spp) and determine the population density of phytoparasitic nematodes in alliaceae crops in the main producing localities of the Arequipa region. Samples of roots and soil were collected in onion, chinese onion, leek and chives crops in the provinces of Arequipa, Castilla, Caylloma and Islay. The identification of nematode genus was found by morphological characteristics and the characterization of Meloidogyne were performed by perineal patterns and electrophoretic pattern of esterase (Est). In the 38 soil samples, different genus of plant-parasitic nematodes was found: Aphelenchus, Dorylaimus, Helicotylenchus, Hemicycliophora, Meloidogyne, Mesocriconema, Mononchus, OGMA, Pratylenchus, Rotylenchus, Tylenchus, Xiphinema and free-living nematodes, in root samples, eight populations of Meloidogyne spp. were found. distributed among three species: (1) M. incognita phenotype Est I1, Rm: 1.0 with 33.33% of frequency and Est I2, Rm: 1.03, 1.07 (50%); (2) M. javanica Est J3, Rm: 1.03, 1.24, 1.37 (16.67%) and an atypical species named Meloidogyne sp. Rm: 0.85 (33.33%). The identification of genus and species phytoparasitic nematodes in alliaceae will allow the adoption of more efficient integrated management measures, because have a distinct parasitism behavior.

 

Keywords: Root-knot nematodes; esterase (Est); perineal pattern, phytoparasitic nematodes.

 

 

Resumen

Cultivo de aliáceas comprenden diversas especies de importancia agrícola para la región Arequipa, entre ellas la cebolla es la de mayor producción en el país, sin embargo, estos cultivos son afectados por nematodos fitoparásitos entre ellas Meloidogyne spp. que ocasiona pérdidas significativas en la producción. El objetivo del presente estudio fue caracterizar al nematodo de las agallas (Meloidogyne spp) y determinar la densidad poblacional de nematodos fitoparásitos en cultivos de aliáceas en las principales localidades productoras de la región Arequipa, se colectaron muestras de raíces y suelo de cultivos de cebolla, cebolla china, poro y cebollín en las provincias de Arequipa, Castilla, Caylloma e Islay. La identificación de los géneros de nematodos se hizo mediante características morfológicas y la caracterización de Meloidogyne se hizo mediante patrones perineales y por padrón electroforético de esterasa (Est). En las 38 muestras de suelo se encontraron doce géneros de nematodos fitoparásitos: Aphelenchus, Dorylaimus, Helicotylenchus, Hemicycliophora, Meloidogyne, Mesocriconema, Mononchus, OGMA, Pratylenchus, Rotylenchus, Tylenchus, Xiphinema y nematodos de vida libre, en muestras de raíces, se encontraron ocho poblaciones de Meloidogyne spp. distribuidas en tres especies: (1) M. incognita fenotipo Est I1, Rm: 1.0 con 33,33% de frecuencia y Est I2, Rm: 1.03, 1.07 (50%); (2) M. javanica Est J3, Rm: 1.03, 1.24, 1.37 (16,67%) y una especie atípica denominada Meloidogyne sp. Rm: 0.85 (33,33%). La identificación de géneros y especies de nematodos fitoparásitos en aliáceas, permitirá adoptar medidas de manejo integrado más eficientes, debido a que poseen un comportamiento de parasitismo distinto.

 

Palabras clave: Nemátodo de las agallas; esterasa (Est); patrón perineal; nematodos parásitos.

 

 

DOI: https://doi.org/10.17268/sci.agropecu.2024.022

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Cite this article:

Peralta-Ccayahuallpa, V. A., Casa-Coila, V. H., Lima-Medina, I., Cuadros-Fernández, L. A., Macedo-Valdivia, D. G. (2024). Caracterización de Meloidogyne spp. y densidad poblacional de nematodos fitoparásitos asociados a cultivos de aliáceas en la región Arequipa, Perú. Scientia Agropecuaria, 15(2), 289-299.

 


 

1. Introducción

 

Dentro de la familia de las aliáceas destaca princi­palmente el género Allium, entre las más comunes se encuentran: A. cepa (cebolla), A. sativum (ajo), A. ampeloprasum (puerro), A. schoenoprasum (cebollino), A. fistulosum (cebolla galesa o cebolla china) y A. ursinum (ajo silvestre o ajo de oso) (Vuković et al., 2023). El centro de origen de la ma­yoría de estas especies se extiende desde la cuenca mediterránea hasta Asia central y son fuentes ricas en flavonoides, compuestos organosulfurados y saponinas con efectos beneficiosos para la salud humana (Soldatenko et al., 2021). Estas hortalizas son caracterizadas por bulbos y hojas que repre­sentan una parte significativa del mercado hortí­cola, tanto en términos de productos frescos como procesados (Pagano et al., 2023), destacando la ce­bolla que ocupa el tercer lugar en términos de su­perficie cosechada a nivel mundial, solo superada por la papa y el tomate (DAPRO, 2020) con una producción mundial para el año 2020 de 115,24 mi­llones de toneladas según datos de la FAO (2023).

En Perú la cebolla es la aliácea que se consume ma­yormente en la región de la costa (Apcho et al., 2017) teniendo una producción en el año 2022 de 503 161 toneladas (SIEA, 2023). Otras de las aliáceas de mayor consumo son la cebolla china y el poro con producciones durante el año 2021 de 26000 y 19000 toneladas respectivamente. La región Are­quipa es la principal productora de cebolla a nivel nacional con un 59,4% de la producción total, así como también ocupa el segundo lugar a nivel na­cional en producción de poro con un 17,5% y en menor escala la cebolla china con un 5,9% del total de la producción nacional (SIEA, 2023).

Las aliáceas son afectadas por una serie de plagas que afectan su producción y calidad, entre ellas se tiene la presencia de nematodos fitoparásitos, que es uno de los mayores factores limitantes en la pro­ducción de estos cultivos. Respecto a la producción de los diferentes cultivos agrícolas afectados por nematodos fitoparásitos se estima pérdidas de en­tre 80 y 118 mil millones de dólares anuales a nivel mundial (Yadav et al., 2023). Siendo uno de los principales géneros de nematodos fitoparásitos de amplia distribución geográfica Meloidogyne (nema­todo de las agallas) el cual tiene una amplia gama de hospedantes y afecta un gran número de culti­vos (Maleita et al., 2022), ocasionando un creci­miento atrofiado, excoriación de las raíces, retraso del crecimiento, clorosis, marchitez prematura y una reducción general del crecimiento de la planta (Rawal, 2020).

El manejo de este nematodo es más difícil en com­paración con otras plagas porque viven en el suelo y atacan las raíces de las aliáceas. Por ello, están directamente asociados a las raíces y el suelo (Faruk, 2019), posicionándose como una de las prin­cipales amenazas para la producción mundial de estos cultivos y causan pérdidas considerables (Nimgarri et al., 2023). Por ende, se le considera un género destructivo, con efectos devastadores y es más frecuente donde las temperaturas oscilan entre 18 y 27 °C, desde regiones templadas a tropicales del mundo (Rawal, 2020).

Dentro de este género, las especies relacionadas a cultivos hortícolas de acuerdo con su importancia y abundancia en Turquía son M. incognita con mayor incidencia seguido de M. javanica, quien se pre­sentó en menor incidencia (Gürkan & Çetintaş, 2024), mientras que en Portugal Meloidogyne in­cognita y M. javanica resultaron ser las especies más prevalentes, seguidas por M. arenaria y M. hapla (Rusinque et al., 2023). También se encontraron a especies de Meloidogyne incognita y M. javanica asociados a cultivos de cebolla en trabajos realiza­dos en Puerto Rico (Nydia & Carbonell, 2012).

Otros géneros de nematodos fitoparásitos asocia­dos a cultivos de aliáceas en cebolla son Helichoty­lenchus, Boleodorus, Filenchus, Aphelenchus, Paratylenchus y Belonolaimus, siendo Aphelenchus el género más abundante en el cultivo (Muhammad et al., 2024). A nivel nacional son pocos los trabajos de investigación sobre caracterización del género Meloidogyne en aliáceas, entre ellas está el de Lara-Ocola (1999), que reporto plantas de cebolla con agallas causadas por Meloidogyne incognita.

La correcta identificación de especies de Meloidogyne, en los diversos cultivos hortícolas, es fundamental para la implementación de estrategias de control, tales como el uso de cultivares resisten­tes, rotación de cultivos y el establecimiento de me­didas cuarentenarias (Vera & Nora, 2014). En ese sentido, el objetivo del presente trabajo fue carac­terizar al nematodo de las agallas (Meloidogyne spp) y determinar la densidad poblacional de ne­matodos fitoparásitos en cultivos de aliáceas en las principales localidades productoras de la región Arequipa.

 

2. Metodología

 

Se colectaron muestras de raíces y suelo de cultivos de A. cepa (cebolla), A. ampeloprasum (poro), A. schoenoprasum (cebollino o cebollín), y A. fistulosum (cebolla china) en seis distritos de la re­gión Arequipa, Perú: Aplao, Dean Valdivia, La Joya, Majes, Sachaca y Santa Rita de Siguas durante el año 2022 (Figura 1). Estas muestras se colectaron de un total de 38 campos, la mayoría de estos campos son de un sistema convencional, con una a tres apli­caciones de nematicidas hasta el momento de la colecta (Tabla 1). De cada campo se colecto 5 sub­muestras de suelo al azar, con estas se preparó una muestra compuesta, de estas se procesó 250 g de suelo por campo, que fueron utilizados para los es­tudios de densidad poblacional. También se colec­taron plantas de cada campo, de estas se evalúo la presencia de agallas en las raíces, sintomatología tí­pica causada por Meloidogyne (Figura 2), obtenién­dose una muestra compuesta de 200 g de raíces por campo para los estudios de caracterización.

 

2.1. Determinación de la densidad poblacional de nematodos fitoparásitos en cultivos de aliáceas

Los estudios de densidad poblacional y caracteriza­ción de Meloidogyne fueron realizados en el labo­ratorio de Fitopatología de la filial Majes de la Uni­versidad Nacional de San Agustín - UNSA, así como en el laboratorio de Nematología/Entomología de la Escuela Profesional de Agronomía de la Univer­sidad Nacional de Altiplano - UNA.

El estudio de la densidad poblacional de nemato­dos fitoparásitos se realizó a partir de las muestras de suelo conforme al método propuesto por (Jenkins, 1964). Para ello se centrifugo y tamizo 100 cm3 de suelo por muestra, seguidamente se utilizó el microscopio óptico para determinar los géneros en base a las claves descritas por (Mai & Mullin, 1996).

 

2.2. Caracterización del género Meloidogyne spp.

 

La identificación de Meloidogyne spp. se realizó mediante caracterización bioquímica por estudio de electroforesis de la enzima esterase (Est) (Carneiro & Almeida, 2001) para ello se utilizó hem­bras adultas de coloración blanca lechosa las cuales fueron extraídos de las raíces afectadas, también se caracterizó mediante la configuración perineal de hembras de Meloidogyne spp. (Hartman & Sasser, 1985), donde se analizaron diez cortes perineales por lamina provenientes de hembras maduras por cada muestra de raíz que presento la sintomatolo­gía causada por Meloidogyne en campo, la identifi­cación de las especies a través del patrón perineal fue hecha tomando en consideración las descrip­ciones y claves pictóricas propuestas por Eisenback et al. (1985), Taylor & Sasser (1983) y Hunt & Handoo (2009).

Figura 1. Mapa de ubicación de los seis distritos (Aplao, Majes, Santa Rita de Siguas, La Joya, Dean Valdivia y Sachaca) donde se colectaron las muestras de suelo y raíces de campos de aliáceas en la región Arequipa, Perú.

 


 

Figura 2. Sintomatología característica ocasionada por Meloidogyne spp. A: Síntomas en parte aérea en cultivo de cebolla china (Distrito de Majes); B: Síntomas en parte aérea en cultivo de cebollín (Distrito de Santa Rita de Siguas); C: Agallas en raíces en cebollín (Santa Rita de Siguas); D: Agallas en raíces en cebolla china (Majes); E: Agallas en raíces en cebolla (Santa Rita de Siguas); F: Síntomas en parte aérea en planta de poro (Majes); G: Agallas en raíces en poro (Majes).

 


 

Tabla 1

Localización y número de campos muestreados de cultivos de aliáceas en la región Arequipa durante el año 2022 y número de aplicaciones de nematicidas

Muestra

Código de muestra

Cultivo

Distrito

Provincia

Año de colecta

Latitud (S)

Longitud (W)

Altura (m.s.n.m.)

Tipo de producción1

N° de aplicaciones de nematicidas2

1

CR1

Cebolla

Aplao

Castilla

25/03/2022

15°59'10.64"

72°28'20.10"

837

C

1

2

CR2

Cebolla

Aplao

Castilla

25/03/2022

15°59'10.91"

72°28'21.15"

825

C

1

3

CR3

Cebolla

Aplao

Castilla

25/03/2022

16°3'45.84"

72°28'49.30"

627

C

1

4

CR12

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

24/10/2022

17°08'10"

71°48'17"

31

C

1

5

CR13

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

24/10/2022

17°08'33"

71°48'21"

20

C

0

6

CR14

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

24/10/2022

17°08'28"

71°48'27"

27

C

1

7

CR15

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

24/10/2022

17°07'04"

71°51'19"

14

C

1

8

CR16

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

24/10/2022

17°06'52"

71°51'19"

51

C

0

9

CR17

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

24/10/2022

17°08'38"

71°51'14"

11

C

0

10

CR18

Cebolla

Dean Valdivia

Islay

2/12/2022

17°08'25.8"

71°48'08,2"

20

C

1

11

CR19

Cebolla

La Joya

Arequipa

2/12/2022

16°27'35"

71°50'24"

1534

C

0

12

CR20

Cebolla

La Joya

Arequipa

2/12/2022

16°27'13"

71°50'24"

1540

C

0

13

CR21

Cebolla

La Joya

Arequipa

2/12/2022

16°27'13"

71°50'21"

1542

C

1

14

CR22

Cebolla

La Joya

Arequipa

2/12/2022

16°27'23"

71°50'00"

1558

C

1

15

CC6

Cebolla china

La Joya

Arequipa

2/12/2022

16°28'25"

71°49'12"

1572

C

1

16

CC1

Cebolla china

Majes

Caylloma

3/04/2022

16°22'51"

72°16'50"

1237

C

2

17

CC2

Cebolla china

Majes

Caylloma

3/04/2022

16°22'21"

72°16'45"

1249

C

2

18

CC3

Cebolla china

Majes

Caylloma

3/04/2022

16°21'27"

72°17'39"

1245

C

2

19

PO1

Poro

Majes

Caylloma

3/04/2022

16°21'11"

72°17'08"

1260

C

2

20

PO2

Poro

Majes

Caylloma

3/04/2022

16°19'33"

72°17'07"

1298

C

3

21

CR6

Cebolla

Majes

Caylloma

5/08/2022

16°19'18"

72°13'51"

1406

C

2

22

CR7

Cebolla

Majes

Caylloma

5/08/2022

16°19'29"

72°14'09"

1393

C

1

23

CR8

Cebolla

Majes

Caylloma

5/08/2022

16°19'28"

72°14'46"

1371

C

2

24

CR9

Cebolla

Majes

Caylloma

5/08/2022

16°21'31"

72°16'34"

1273

C

1

25

CC4

Cebolla china

Majes

Caylloma

5/08/2022

16°22'02"

72°15'52"

1302

C

2

26

CC5

Cebolla china

Majes

Caylloma

5/08/2022

16°22'02"

72°15'52"

1302

C

2

27

CR23

Cebolla

Sachaca

Arequipa

4/12/2022

16°25'38"

71°35'38"

2219

C

0

28

CR24

Cebolla

Sachaca

Arequipa

4/12/2022

16°25'38"

71°35'45"

2221

C

0

29

CR25

Cebolla

Sachaca

Arequipa

4/12/2022

16°25'30"

71°35'45"

2220

C

1

30

CR26

Cebolla

Sachaca

Arequipa

4/12/2022

16°25'34"

71°35'42"

2226

C

0

31

CC7

Cebolla china

Sachaca

Arequipa

4/12/2022

16°25'38"

71°35'09"

2220

E

0

32

CV1

Chives

Santa Rita de Siguas

Arequipa

18/02/2022

16°30'07.4"

72°05'07.9"

1644

C

1

33

CV2

Chives

Santa Rita de Siguas

Arequipa

23/03/2022

16°29'14"

72°05'56"

1283

C

0

34

CV3

Chives

Santa Rita de Siguas

Arequipa

9/04/2022

16°31'35"

72°04'41"

1240

C

1

35

CR4

Cebolla

Santa Rita de Siguas

Arequipa

10/04/2022

16°30'01"

72°05'42"

1265

C

2

36

CR5

Cebolla

Santa Rita de Siguas

Arequipa

10/04/2022

16°30'07"

72°05'43"

1262

C

3

37

CR10

Cebolla

Santa Rita de Siguas

Arequipa

5/08/2022

16°30'43"

72°04'43"

1256

C

1

38

CR11

Cebolla

Santa Rita de Siguas

Arequipa

5/08/2022

16°30'09"

72°04'38"

1271

C

1

1 C = Convencional, E = Ecológico, 2Número de aplicaciones con nematicidas químicos realizadas hasta el momento de la colecta.


 

3. Resultados y discusión

3.1. Determinación de la densidad poblacional de nematodos fitoparásitos en cultivos de aliáceas

De acuerdo con los análisis realizados de las mues­tras de suelo colectadas de los distritos de Aplao, Dean Valdivia, La Joya, Majes, Sachaca y Santa Rita de Siguas fue registrada la ocurrencia de varios gé­neros de nematodos fitoparásitos asociados a los cultivos de: Cebolla, cebolla china, cebollín y poro. Los géneros encontrados fueron Helicotylenchus con 97,37% de frecuencia en los campos colecta­dos, Aphelenchus (73,68%), Meloidogyne (65,79%), Rotylenchus (55,26%), Mesocriconema (31,58%), Ty­lenchus (31,58%), Pratylenchus (26,32%), Xiphinema (13,16%), Dorylaimus (5,26%), Hemicycliophora (5,26%), Mononchus (5,26%), OGMA (2,63%) y ne­matodos de vida libre (100%) (Tabla 2), los géneros con una frecuencia mayor al 50% fueron: Helicoty­lenchus, Aphelenchus, Meloidogyne y Rotylenchus, de acuerdo a Konate & Kone (2019) los géneros He­licotylenchus, Tylenchus y Tylenchorhynchus fueron reportados parasitando a plantas de cebolla con una alta frecuencia, por otro lado Pokharel et al. (2008) encontro a Pratylenchus asociado a cultivos de cebolla en altas frecuencias.

La densidad poblacional del género Meloidogyne en los distritos de Santa Rita de Siguas y Majes pre­sentan los niveles más altos, con 56 y 54 especíme­nes / 100 cm3 de suelo respectivamente, otro de los géneros que destaca por su elevado nivel poblacio­nal es Helicotylenchus con 93 especímenes / 100 cm3 de suelo esta información coincide con (Konate et al., 2019), pues este género es considerado como uno de los más importantes causadores de daños en cebolla. Otro género con alto nivel poblacional es Mesocriconema (69 especímenes / 100 cm3 de suelo) estos datos concuerdan con el trabajo de Caballero-Luque et al., (2021) quienes tambien encontraron altas poblaciones de Mesocriconema en Alcachofa, para los demás géneros observados las densidades poblaciones fueron de entre 1 y 12 especímenes / 100 cm3 de suelo (Tabla 2).

Los nematodos de vida libre fueron encontrados en todos los campos colectados presentando una ma­yor densidad poblacional en el distrito de Sachaca con 140 especímenes / 100 cm3 de suelo, según Yadav et al., (2018) estos nematodos especialmente los que se alimentan de bacterias y hongos juegan un papel importante en el ciclo de nutrientes del suelo, a través de la descomposición de restos de animales y vegetales y la mineralización del nitró­geno indirectamente en sistemas de producción.

En la región Arequipa existen muy pocos reportes sobre la ocurrencia del género Meloidogyne en aliá­ceas. De acuerdo con Lara-Ocola (1999) este genero fue encontrado afectando plantas de cebolla. Sin embargo, este género parasita y oca­siona daños al sistema radicular de varios cultivos, tales como alcachofa (Caballero-Luque et al., 2021), paprika (Machaca, 2017), cucurbitáceas (Miranda-Barrios et al., 2020) entre otros. También se reportó este género parasitando aliáceas y otras hortalizas en la India, donde se encontró altas densidades po­blacionales, considerándolos como uno de los fito­parásitos más importantes, causantes de la reduc­ción del sistema radicular, plantas con follaje ama­rillento, crecimiento deficiente y disminución de rendimiento del cultivo (Simon et al., 2011). Además, del daño directo, los nematodos agalladores actúan como un agente predisponente a otros patógenos fúngicos y bacterias presentes en el suelo, agra­vando así el problema (Khan et al., 2023).

Reportes de nivel poblacional de nematodos aso­ciados a las aliáceas en otros países muestran a Pratylenchus penetrans, Aphelenchoides, Ditylen­chus dipsaci como las que presentaron densidad poblacionales más altas, seguido de Aphelenchus, Helicotylenchus, Hemicriconemoides, Hemiccicliop­hora, Hoplolaimus, Meloidogyne, Longidorus, Tri­chodorus y Xiphinema (Pokharel et al., 2008), En Burkina Faso en cebolla se reportó a Helicotylen­chus, Tylenchus, Rotylenchulus y Tylenchorhinchus en mayor número poblacional, por ende causando daños a las raíces, seguido de Pratylenchus, Xiphi­nema, Telotylenchus, Ditylenchus, Escutelónema, Trichodorus, Criconemoides y Meloidogyne que pre­sentaron niveles más bajos de especímenes (Konate et al., 2019).

Los nematodos fitoparásitos encontrados repercu­ten en el rendimientos y calidad de las aliáceas, un aspecto a considerar es el uso de la tierra, como los monocultivos, que pueden alterar la salud del suelo y provocar la acumulación de estos nematodos fi­toparásitos en los suelos a lo largo del tiempo (Enyiukwu et al., 2021), todo ello ocasionara la pér­dida de calidad del suelo y por ende una baja productividad.

 

3.2. Caracterización del género Meloidogyne spp.

De los 38 campos evaluados, se encontró raíces de aliáceas con sintomatología típica de Meloidogyne en seis campos muestreados correspondientes a los cultivos de cebolla, cebolla china, poro y cebollín (Figura 2). De estas, tres especies de Meloidogyne fueron encontrados, con 1 fenotipo esterasa para Meloidogyne javanica (Est J3, Rm: 1,03, 1,24, 1,37), 2 fenotipos para Meloidogyne incognita (Est I2, Rm: 1,03, 1,07; Est I1, Rm: 1,00), y 1 fenotipo esterasa atípico desconocido de una sola banda al que se denominó Meloidogyne sp. (Rm: 0,85) (Figura 3).


 

Tabla 2

Densidad poblacional y frecuencia de nematodos asociados a cultivos de: A. cepa (cebolla), A. ampeloprasum (poro), A. schoenoprasum (cebollín), y A. fistulosum (cebolla china) en cuatro provincias de la región Arequipa: Arequipa, Castilla, Caylloma e Islay

Provincia/Distrito

Código de muestra

Cultivo

Generos1

Aphe

Dor

Helico

Hem

Mel

Meso

Mon

OGMA

Prat

Roty

Tychus

Vida Libre

Xiphi

Arequipa
La Joya

CR19

Cebolla china

 

 

17

 

 

7

 

 

 

 

 

26

4

CR20

Cebolla

2

 

13

 

 

 

 

 

2

 

 

33

 

CR21

Cebolla

3

 

7

2

 

 

1

 

 

 

 

16

 

CR22

Cebolla

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4

 

CC6

Cebolla

 

 

17

 

 

9

 

 

 

 

 

48

 

Arequipa
Sachaca

CC7

Cebolla china

1

 

1

 

12

69

 

2

2

 

5

52

 

CR23

Cebolla

1

 

17

 

 

 

 

 

 

 

5

22

 

CR24

Cebolla

5

 

4

 

 

 

 

 

 

 

 

140

 

CR25

Cebolla

 

 

1

 

 

 

 

 

 

 

 

22

 

CR26

Cebolla

 

 

1

 

 

6

 

 

3

 

 

36

 

Arequipa
Santa Rita de Siguas

CV2

Cebollín

 

 

4

 

 

 

 

 

 

 

 

16

 

CR11

Cebolla

3

 

46

 

4

 

 

 

3

2

 

52

 

CR4

Cebolla

7

 

13

 

56

 

 

 

 

6

 

44

 

CR5

Cebolla

5

 

11

 

46

 

 

 

 

4

 

38

 

CV3

Cebollín

8

 

32

 

3

 

 

 

 

 

 

68

 

CV1

Cebollín

5

 

37

 

17

 

 

 

 

9

1

57

 

CR10

Cebolla

3

 

6

 

12

 

 

 

5

5

 

65

 

Castilla
Aplao

CR1

Cebolla

4

 

26

 

9

2

2

 

 

5

1

34

 

CR2

Cebolla

8

 

17

 

8

2

 

 

2

2

1

6

 

CR3

Cebolla

5

2

13

 

 

3

 

 

 

5

3

27

1

Caylloma
Majes

CR6

Cebolla

 

 

9

 

 

 

 

 

 

3

 

49

 

CR7

Cebolla

3

 

93

 

3

3

 

 

6

6

4

44

1

CR8

Cebolla

 

 

6

 

3

 

 

 

 

 

 

27

 

CC4

Cebolla china

4

 

8

 

12

 

 

 

 

2

1

31

 

CC5

Cebolla china

2

 

12

 

36

3

 

 

 

 

4

46

 

CC3

Cebolla china

1

 

16

 

1

 

 

 

 

4

 

48

 

PO2

Poro

5

 

32

3

3

 

 

 

3

8

3

46

 

CR9

Cebolla

 

 

5

 

 

 

 

 

 

 

 

18

1

PO1

Poro

12

 

56

 

54

 

 

 

3

7

 

45

2

CC1

Cebolla china

4

 

18

 

34

 

 

 

 

6

 

44

 

CC2

Cebolla china

5

 

26

 

9

 

 

 

1

5

 

39

 

Islay
Dean Valdivia

CR15

Cebolla

 

 

12

 

4

 

 

 

 

6

 

62

 

CR16

Cebolla

1

2

2

 

8

 

 

 

 

1

 

6

 

CR17

Cebolla

2

 

5

 

2

4

 

 

 

3

2

38

 

CR13

Cebolla

7

 

8

 

12

1

 

 

 

4

 

55

 

CR14

Cebolla

3

 

6

 

2

3

 

 

 

5

1

47

 

CR18

Cebolla

2

 

3

 

5

 

 

 

 

 

 

4

 

CR12

Cebolla

2

 

2

 

3

 

 

 

 

 

 

54

 

Frecuencia (%)

73.68

5.26

97.37

5.26

65.79

31.58

5.26

2.63

26.32

55.26

31.58

100

13.16

1Géneros de nematodos fitoparásitos y de vida libre en 100 cm3 de suelo, Aphe = Aphelenchus; Dor: Dorylaimus; Helico: Helicotylenchus; Hem: Hemicycliophora; Mel: Meloidogyne; Meso: Mesocriconema; Mon: Mononchus; Prat: Pratylenchus; Roty: Rotylenchulus; Tychus: Tylenchus; Xiphi: Xiphinema.


 

En los campos con plantas de aliáceas con sintoma­tología características de Meloidogyne fueron en­contrados un total de ocho poblaciones de Me­loidogyne, una población de M. javanica Est J3, dos poblaciones de M. Incognita Est I1, tres poblaciones de M. incognita Est I2 y dos poblaciones de Me­loidogyne sp.; la especie con más frecuencia fue M. incognita I2 con un 50%, seguida de M. incognita I1 y M. sp., con 33,33% cada uno y por último M. javanica J3 con 16,67% quien tuvo la más baja fre­cuencia (Tabla 3).

Cabe destacar que las agallas producidas por Me­loidogyne en las raíces de aliáceas fueron observa­dos mayormente en zona apical produciendo rami­ficaciones secundarias, esta característica de para­sitismo coincide con lo relatado por Rusinque et al. (2021) quien menciona la presencia de agallas cau­sada por Meloidogyne en forma de gancho en cul­tivo de arroz, y se ubican principalmente en las puntas de las raíces, afectando el desarrollo y la fi­siología de las raíces, además provoca una profusa proliferación de raíces muy delgadas y esponjosas que conducen a pérdidas sustanciales de rendimiento.

De las especies encontradas, M. incognita (I1 y I2) ha sido reportado en las diferentes provincias de la región Arequipa causando daños a plantas de alca­chofa (Caballero-Luque et al., 2021), cucurbitáceas (Miranda-Barrios et al., 2020) y paprika (Machaca, 2017) con las frecuencias más altas, así como tam­bién en el norte del Perú causando daños a plantas de poro (Amaya, 1982). Por otro lado, la especie M. javanica ha sido reportado en cultivos como frejol para los valles de Chicama y Moche en bajas fre­cuencias (Amaya, 1982) y en Sacha Inchi en China se encontró a M. javanica (Est J3, Rm:1,0, 1,25 y 1,4) (Wang et al., 2013). Con respecto a la especie atípica de Meloidogyne, existen diversos reportes sobre esta especie en diferentes cultivos en la re­gión Arequipa tales como cucurbitáceas y alca­chofa (Miranda-Barrios et al., 2020; Caballero-Luque et al., 2021) pero se presentaron en baja fre­cuencias. M. incognita es la especie más predomi­nante en aliáceas y en los diferentes cultivos citados siendo la principal causante de agallas en las raíces, enanismo, marchitez y amarillamiento llegando a reducir los rendimientos y la ganancia económica (Nydia & Carbonell, 2012), por otro lado, se observó la pre­sencia de dos especies de Meloidogyne en un mismo campo agrícola, teniedose a M. incognita y M. sp. en los campos PO2 y CC1 la mezcla de más de una especie en un campo agrícola ya fue rela­tado por (Machaca, 2017; Caballero-Luque et al., 2021; Miranda-Barrios et al., 2020), las mezclas de estas especies ya reportadas amplían las condicio­nes de parasitismo de este género, de esta forma, existe mayor posibilidad de éxito de este género en parasitar cultivos de aliáceas en la región Arequipa.

Meloidogyne javanica Est J3 es la primera especie reportada en la región Arequipa en el cultivo de ce­bollín ubicado en el distrito de Santa Rita de Siguas y a pesar de encontrarse en baja frecuencia en los campos evaluados y los reportes descritos podría convertirse en una amenaza para la producción de este cultivo, en concordancia con Wang et al. (2013) quien indica que esta esta especie podría ser una amenaza importante para la producción de Sacha inchi. Los daños provocados por M. javanica en al­tas poblaciones iniciales en cultivo de soya provo­caron una reducción significativa en el área foliar, en la masa radicular y en el peso seco total de la parte área y los granos (Asmus & Ferraz, 2001).

Figura 3. Fenotipo esterasa (Est) de Meloidogyne spp. de poblaciones colectadas en cultivos de aliáceas en la región Arequipa. a: M. javanica (J3); b: M. incógnita (I2); c: M. incognita (I1) y d: Meloidogyne sp. Se utilizó a M. javanica (J3) como fenotipo de esterasa estándar.


 


 

Tabla 3

Ocurrencia de fenotipos de esterasa (Est) de poblaciones de Meloidogyne spp. de muestras de plantas colectadas en campos de aliáceas en la región Arequipa, Perú

Provincia
Distrito

Localización

Código de muestra

Cultivo

Especie

Ocurrencia (%)

Fenotipo esterasa (Est)

Arequipa,
Santa Rita de Siguas

Lateral 9, Fundo Santa Gabriela

CV1

Cebollín

M. javanica

100

J3

Lateral 8, Fundo Agropel

CR4

Cebolla

M. incognita

100

I1

Lateral 10, Fundo Renacer

CR5

Cebolla

M. incognita

100

I2

Caylloma,
Majes

B-4, Irrigación Majes

PO1

Poro

M. incognita

100

I2

B-3, Irrigación Majes

PO2

Poro

M. incognita

77,36

I2

 

 

 

M. sp

22,64

M. sp

C-2, Irrigación Majes

CC1

Cebolla china

M. incognita

92,59

I1

 

 

M. sp

7,41

M. sp

 

Figura 4. Cortes perineales de Meloidogyne spp. de poblaciones colectadas en cultivos de aliáceas de la región Arequipa. A) M. javanica (J3); b) M. incógnita (I2); c) M. incognita (I1) y d) Meloidogyne sp.

 


 

Para complementar la caracterización del género Meloidogyne se realizaron cortes perineales de las hembras del nematodo, encontrándose tres espe­cies de Meloidogyne, el primero M. incognita pre­sento dos configuraciones perineales: La primera M. incognita est I1 presentó un arco dorsal alto y cuadrado, con presencia de estrías lisas y ondula­das, sin líneas laterales distintivas coincidiendo con (Eisenback et al., 1985; Machaca, 2017); la segunda configuración perineal M. incognita I2 presentó un arco dorsal alto y cuadrado, con presencia de es­trías lisas y onduladas, campo lateral izquierdo pro­minente en comparación al campo lateral derecho coincidiendo con (Hunt & Handoo, 2009); la se­gunda especie encontrada fue M. javanica que presento un arco dorsal alto y cuadrado e incisiones laterales (estrías transversales) marcadas que sepa­ran las regiones dorsal y ventral que son únicas para la especie (Peraza-Padilla, 2021; Taylor & Sasser, 1983), por último se encontró una configuración perineal que no coincide con ninguna de las espe­cies descritas por (Eisenback et al., 1985) al que se le denomino Meloidigyne sp. (Figura 4). Estos resul­tados coinciden con los encontrados en los análisis bioquímicos del género Meloidogyne.

La identificación de las especies de Meloidogyne nos permitirá proponer nuevas estrategias de con­trol en base a estudios ya realizados sobre las mis­mas especies identificadas en otros lugares como: La rotación de cultivos, el uso de variedades resis­tentes, control biológico como la utilización de Paecilomyces lilacinus (Thom) para el control de M. javanica (Tiganomilani et al., 1995), control químico, entre otros con el fin de reducir o mantener las poblaciones de Meloidogyne por debajo de los umbrales de daño para así tener una producción sostenible (Enyiukwu et al., 2021).

 

4. Conclusiones

 

Se identificaron un total de 12 géneros de nemato­dos fitoparásitos además de nematodos de vida libre en cultivos de aliáceas en la región Arequipa, siendo Helicotylenchus, Aphelenchus, Meloidogyne y Rotylenchus los géneros más frecuentes.

Por análisis bioquímico se identificaron dos espe­cies de Meloidogyne asociado a cultivos de aliáceas, y una especie atípica. De estas poblaciones, M. incognita presenta la más alta frecuencia y está dis­tribuida en los distritos de Santa Rita de Siguas y Majes, seguido de Meloidogyne sp en el distrito de Majes y M. javanica en Santa Rita de Siguas.

La correcta identificación de nematodos fitoparási­tos causando daños en aliáceas permite entender su distribución, frecuencia y nivel poblacional y así poder implementar medidas de manejo eficientes.

Se sugiere realizar un estudio sobre el comporta­miento y los daños que produce el género Helicotylenchus, así como también realizar pruebas de agresividad de las especies de Meloidogyne en­contradas en los diferentes cultivos de aliáceas de la región, pruebas de reacción de genotipos de aliáceas a las especies de este género.

 

Agradecimientos

A UNSA INVESTIGA por el apoyo financiero de este trabajo de investigación enmarcado dentro del Proyecto “Etiología y caracte­rización de hongos y nematodos (Meloidogyne spp) causantes de las principales enfermedades de las aliáceas en la región núcleo productora de Arequipa ” con contrato de financiamiento número IBA-IB-03-2020-UNSA; al laboratorio de Fitopatología filial Majes el Pedregal de la Facultad de Agronomía de la Universidad Nacio­nal de San Agustín de Arequipa, así como también al laboratorio de Entomología/Nematología de la Escuela Profesional de Agronomía de la Universidad Nacional del Altiplano de Puno.

 

Conflicto de intereses

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

 

Contribución de los autores

Conceptualización: Victor Casa-Coila, Victor Peralta-Ccayahuallpa. Investigación: Victor Casa-Coila, Victor Peralta-Ccayahuallpa, Israel Lima-Medina, Luis Cuadros-Fernández, Dennis Macedo-Valdivia. Metodología: Victor Casa-Coila, Victor Peralta-Ccayahuallpa, Israel Lima-Medina, Luis Cuadros-Fernández, Dennis Macedo-Valdivia. Administración del proyecto: Victor Casa-Coila, Victor Peralta-Ccayahuallpa. Software: Victor Peralta-Ccayahuallpa. Validación: Victor Casa-Coila, Israel Lima-Medina. Visualización: Victor Casa-Coila. Redacción – borrador original: Victor Peralta-Ccayahuallpa. Escritura – revisión y edición: Victor Casa-Coila, Victor Peralta-Ccayahuallpa, Israel Lima-Medina, Luis Cuadros-Fernández, Dennis Macedo-Valdivia.

ORCID

V. A. Peralta-Ccayahuallpa  https://orcid.org/0009-0006-2156-9409

V. H. Casa-Coila  https://orcid.org/0000-0001-5081-6401

I. Lima-Medina  https://orcid.org/0000-0002-4740-0402

L. A. Cuadros-Fernández  https://orcid.org/0000-0001-9547-1101

D. G. Macedo-Valdivia  https://orcid.org/0000-0002-0442-9395

 

Referencias bibliográficas

 

Amaya, J. (1982). El "Nematodo del nudo de la raíz" en la costa norte del Perú. In Proceedings of the Third Research & Planning Conference on Root-Knot Nematodes, Meloidogyne spp. Department of Plant Pathology, North Carolina State University, 40-45 pp.

Apcho, E., Caballero, M., & Miranda, R. (2017). Planeamiento Estratégico de la Cebolla en el Perú al 2027. Pontificia Universidad Católica del Perú.

Asmus, G. L., & Ferraz, L. C. (2001). Relações entre a densidade populacional de Meloidogyne javanica e a área foliar, a fotossíntese e os danos causados a variedades de soja. Nematologia Brasileira, 25(1), 1-13.

Caballero-Luque, T. M., Casa-Coila, V. H., & Lima-Medina, I. (2021). Characterization of root-knot nematode (Meloidogyne spp.) and frequency of nematodes associated with artichoke crops in the “Irrigación Majes”, Arequipa, Peru. Journal of Plant Diseases and Protection, 128(2), 627-632. https://doi.org/10.1007/s41348-020-00398-8

Carneiro, R. G., & Almeida, M. R. (2001). Técnica de eletroforese usada no estudo de enzimas dos nematoides de galhas para identificação de espécies. Nematologia Brasileira, 25(1), 35-34.

DAPRO, D. G. (2020). Informe Estadístico de la Cebolla. Bolivia. Ministerio de Desarrollo productivo y Economía Rural.

Eisenback, J. D., Sasser, J., & Carter, C. (1985). Diagnostic characters useful in the identification of the four most common species of root-knot nematodes (Meloidogyne spp.). An advanced treatise on Meloidogyne, 1, 95-99.

Enyiukwu, D. N., Ononuju, C. C., Okeke, C., & Chukwu, L. A. (2021). Plant Parasitic Nematodes, Serious but Most Trivialized Biotic Challenge against Food Security: A spotlight on their Management for Sustainable Agriculture and Public Health. Direct Research Journal of Public Health and Environmental Technology, 6, 104-112. https://doi.org/10.26765/DRJPHET947520168

FAO, (07 de 11 de 2023). Food and Agriculture Organization of the United Nations. FAOSTAT Website. Obtenido de http://www.fao.org/faostat/en/#data

Faruk, I. (2019). Efficacy of Organic Soil Amendments and a Nematicide for Management of Root-Knot Nematode Meloidogyne Spp. of Onion. American Journal of Bioscience and Bioengineering, 7(4), 57-64. https://doi.org/10.11648/j.bio.20190704.11

Gürkan, T., & Çetintaş, R. (2024). Detection of Root-Knot Nematode Species and Races in Kahramanmaraş Province, Türkiye. Kahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi Tarım ve Doğa Dergisi, 27(1), 174-182. https://doi.org/10.18016/ksutarimdoga.vi.1296708

Hartman, K., & Sasser, J. (1985). Identification of Meloidogyne species on the basis of differential host test and perineal-pattern morphology. An advanced treatise on Meloidogyne. North Carolina State University Graphics, 2, 69-77.

Hunt, D. J., & Handoo, Z. A. (2009). Taxonomy, identification and principal species. In Root-knot nematodes. Wallingford UK: CABI, 55-97 pp.

Jenkins, W. (1964). A rapid centrifugal-flotation technique for separating nematodes from soil. Plant Disease Reporter, 48(9).

Khan, A., Ansari, S. A., Haris, M., Hussain, T., & Khan, A. A. (2023). Meloidogyne Species: Threat to Vegetable Produce. En In Root-Galling Disease of Vegetable Plants (págs. 61-83). Singapore: Springer Nature Singapore.

Konate, A. Y., Ouuedraogo, S. L., & Kone, D. (2019). Etude faunistique des nématodes phytoparasites de l’oignon (Allium cepae L., Alliaceae) au Burkina Faso. International Journal of Biological and Chemical Sciences, 13(3), 1388-1395. Doi: 10.4314/ijbcs.v13i3.14

Lara-Ocola, J. (1999). Determinación, distribución y evaluación del grado de ataque del “Nematodo Nodulador” Meloidogyne incognita en Allium cepa L., realizado en nueve distritos de la provincia de Arequipa. Universidad Nacional de San Agustín, 67 pp.

Machaca, C. P. (2017). Identificación de Meloidogyne spp. por morfología é isoenzimas en pimiento páprika (Capsicum annuum L.) en tres irrigaciones de la región Arequipa. Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa.

Mai, W. F., & Mullin, P. G. (1996). Plant-parasitic nematodes: A pictorial key to genera. Ithaca, NY: Cornell University Press.

Maleita, C., Correia, A., Abrantes, I., & Esteves, I. (2022). Susceptibility of crop plants to the rootknot nematode Meloidogyne luci, a threat to agricultural productivity. Phytopathologia Mediterranea, 61(1), 169-179. https://doi.org/10.36253/phyto-13369

Miranda-Barrios, E., Quispe-Castro, R., Lima-Medina, I., Bravo-Portocarrero, R., & Anculle-Arenas. (2020). Identificación de especies del género Meloidogyne en cucurbitáceas: Distribución y ocurrencia en Arequipa, Perú. Scientia Agropecuaria, 11(2), 195–202. https://doi.org/10.17268/sci.agropecu.2020.02.06

Muhammad, B., Bibi, K., Khan, M. S., & Kiran, A. (2024). Association of Plant Parasitic Nematodes with some Vegetables Crops of Khyber Pakhtun Khwa, Pakistan. Alexandria Science Exchange Journal, 45(1), 21-26. https://doi.org/10.21608/ASEJAIQJSAE.2024.336797

Nimgarri, H., Khan, M. R., Rahimi, M. H., Yahyazai, M., & Mondal, S. (2023). Root-knot nematodes (Meloidogyne spp.) in cucumber under protected cultivation: incidence, management and avoidable yield loss in Afghanistan. Indian Phytopathology, 13-22. https://doi.org/10.1007/s42360-023-00622-z

Nydia, & Carbonell, V. (2012). Conjunto Tecnológico para la Producción de Cebolla. Universidad de Puerto Rico, Estación Experimental Agrícola, 156 pp.

Pagano, A., Macovei, A., Xia, X., Padula, G., Holubowicz, R., & Balestrazzi, A. (2023). Seed Priming Applied to Onion-Like Crops: State of the Art and Open Questions. Agronomy, 13(2), 278-288. https://doi.org/10.3390/agronomy13020288

Peraza-Padilla, W. (2021). Identificación morfológica y molecular de Meloidogyne javanica en una plantación de papaya (Carica papaya l.) en Pococí, Limón, Costa Rica. Agronomía Costarricense, 45(2), 41-55. http://dx.doi.org/10.15517/rac.v45i2.47766

Pokharel, R. R., Larsen, H., Hammon, B., Gourd, T., & Bartolo, M. (2008). Plant parasitic nematodes, soil and root health of Colorado onion fields. Western Colorado Research Center, Colorado State University. Annual report. Ft. Collins: Colorado State University.

Rawal, S. (2020). A review on root-knot nematode infestation and its management practices through different approaches in tomato. Tropical Agroecosystems (TAEC), 1(2), 92-96. http://doi.org/10.26480/taec.02.2020.92.96

Rusinque, L., Camacho, M. J., Serra, C., Nóbrega, F., & Inacio, M. L. (2023). Root-knot nematode assessment: species identification, distribution, and new host records in Portugal. Frontiers in Plant Science, 14, 1230968. https://doi.org/10.3389/fpls.2023.1230968

Rusinque, L., Maleita, C., Abrantes, I., Palomares-Rius, J. E., & Inácio, M. L. (2021). Meloidogyne graminicola: A threat to rice production: Review update on distribution, biology, identification, and management. Biology, 10(11), 1163. https://doi.org/10.3390/biology10111163

SIEA, Sistema Integrado de Estadísticas Agrarias (2023). Perfil productivo de los principales cultivos del sector. Lima: Ministerio de Desarrollo Agrario y Riego. Obtenido de https://siea.midagri.gob.pe/portal/siea_bi/index.html

Simon, S., Singh, K., & Ghosh, G. (2011). Distribution of root-knot nematode on major field crops in Uttar Pradesh (India). Archives of Phytopathology and Plant Protection, 44(2), 191-197. https://doi.org/10.1080/03235408.2010.505365

Soldatenko, A. V., Ivanova, M. I., Bukharov, A. F., Kashleva, A. I., & Seredin, T. M. (2021). Prospects for introducing into the culture wild species of the genus Allium L. food direction. Vegetable crops of Russia, 1, 20-32. https://doi.org/10.18619/2072-9146-2021-1-20-32

Taylor, A. L., & Sasser, J. N. (1983). Biología, identificación y control de los nematodos de nódulo de la raíz. Universidad de Carolina del Norte, 111 pp.

Tiganomilani, M., Carneiro, R., Defaria, M., Frazao, H., & Mccoy, C. (1995). Isozyme Characterization and Pathogenicity of Paecilomyces fumosoroseus and P. lilacinus to Diabrotica speciosa (Coleoptera: Chrysomelidae) and Meloidogyne javanica (Nematoda: Tylenchidae). Biological control, 5(3), 378-382. https://doi.org/10.1006/bcon.1995.1044

Vera, O., & Nora, J. (2014). Técnica molecular de PCR para identificar las principales especies de Meloidogyne spp. en poblaciones provenientes de Perú. Universidad Nacional Agraria La Molina.

Vuković, S., Popović-Djordjević, J. B., Kostić, A. Ž., Pantelić, N. D., Srećković, N., Akram, M., . . . Stanković, J. S. (2023). Allium Species in the Balkan Region Major Metabolites, Antioxidant and Antimicrobial Properties. Horticulturae, 9(3), 408. https://doi.org/10.3390/horticulturae9030408

Wang, Y., Xie, Y., Cui, H. D., & Dong, Y. (2013). First Report of Meloidogyne javanica on Sacha Inchi (Plukenetia volubilis) in China. Plant Disease, 98(1), 165-165. https://doi.org/10.1094/PDIS-03-13-0241-PDN

Yadav, K., Bharti, L., & Chaubey, A. K. (2023). Effect of Phytoparasitic Nematodes on Agricultural Yield: Current Progress and Challenges. En Nematode-Plant Interactions and Controlling Infection, 62-84 pp. doi: 10.4018/978-1-6684-8083-0.ch004

Yadav, S., Patil, J., & Kanwar, R. S. (2018). The role of free living nematode population in the organic matter recycling. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences, 7(6), 1-9. https://doi.org/10.20546/ijcmas.2018.706.321