Efecto de tripomastigotes de Trypanosoma cruzi C1 atenuados por temperatura a la infección experimental en Mus musculus BALB/c con formas infectivas del parásito

Autores/as

  • Yolanda Vértiz Universidad Nacional de Trujillo
  • Hermes Escalante Universidad Nacional de Trujillo

Resumen

La investigación estuvo orientada a determinar el efecto de los tripomastigotes atenuados por calor de T. cruzi a la infección experimental  en Mus musculus BALB/c con la forma infectiva del parásito; para lo cual, se utilizaron tripomastigotes de T. cruzi cepa C1 y ejemplares de Mus musculus BALB/c “ratón”. Los tripomastigotes se obtuvieron en Medio Grace a partir de epimastigotes mantenidos en un cultivo axénico en medio bifásico (BHI + 10% de sangre / PYLB), los que fueron atenuados por shock térmico a temperaturas de  37; 37,5; 38; 38,5 y 39ºC con tiempos de exposición de 30, 60, 90 y 120 segundos y posteriormente inoculados a 20 ejemplares de Mus musculus BALB/c. A los 30 días de la inoculación, se evidenció la presencia del parásito en tres ratones del grupo experimental y en los 17 ratones restantes la ausencia del parásito. Verificada la efectividad de la atenuación, estos parásitos fueron inoculados a 68 ratones del grupo experimental  (4 ratones/17 casos positivos) con una dosis de 106 parásitos/0.2 mL al 0, 7, 21 día; mientras que al grupo control comprendido por cuatro ratones sólo se suministró una dosis de 0.2 mL de Medio Grace. Después de los 30 días de inoculación con la forma infectiva del parásito, una semana posterior a la última inmunización, se obtuvo un 96% de supervivencia en los ratones del grupo experimental y 25% de supervivencia en los ratones del grupo control; con lo cual se comprobó que los parásitos atenuados a temperaturas de 37; 37,5; 38; 38,5 y 39ºC generan un efecto protector en Mus musculus BALB/c.

Palabras clave: Trypanosoma cruzi, tripomastigotes, epimastigotes, cultivo axénico.

Citas

Rodriguez Coura J, Borges-Pereira J. Chagas disease: 100 years after its discovery. A systemic review: Act Tropica 2010; 115: 5-13

Lescure F-X, Le Loup G, Freilij H, Develoux M. Chagas disease: changes in knowledge and management. Lancet Infect Dis 2010; 10: 556-570

Hunter Gc, Borrini-Mayorí K, Ancca Juarez J, Castillo Neyra R, et la. A field trial of alternative target screening strategies for Chagas disease in Arequipa, Perú. PLoS Neg Trop Dis 2012; 6(1): e1468

Vega S, Náquira C. Manual de procedimientos de laboratorio para el diagnóstico de la Tripanosomiasis americana (Enfermedad De Chagas). 2da ed. Serie de Normas Técnicas Nº 26. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional De Salud; 2006.

De Lima AR, Arévalo P, Bastidas V, Bolívar V, Navarro MC, Contreras VT. Efecto de las condiciones de mantenimiento de Trypanosoma cruzi sobre la calidad de los antígenos para el diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas. Revista de la facultad de ciencias de la salud 2007; 11:20-26.

Garg N, Bhatia V. Current status and future prospects for a vaccine against American trypanosomiasis. Expert Rev Vaccines 2005; 4:867-80.

Cazorla SI, Frank FM, Malchiodi EL. Vaccination approaches against Trypanosoma cruzi infection. Expert Rev Vaccines 2009; 8:921-35.

Dumonteil E. Vaccine development against Trypanosoma cruzi and Leishmania species in the post-genomic era. Infect Genet Evol 2009; 9:1075-82.

Kjos SA, Snowden KF, Craig TM, Lewis B, Ronald N, Olson JK. Distribution and characterization of canine Chagas disease in Texas. Vet Parasitol 2008; 152:249-56.

Garg N, Bhatia V. Current status and future prospects for a vaccine against American trypanosomiasis. Expert Rev Vaccines 2005; 4:867-80.

Basombrio MA. Trypanosoma cruzi: partial prevention of the natural infection of guinea pigs with a killed parasite vaccine. Exp Parasitol 1990; 71:1-8.

Wrightsman RA, Miller MJ, Saborio JL, Manning JE. Pure paraflagellar rod protein protects mice against Trypanosoma cruzi infection. Infect Immun 1995; 63:122-5.

Miller MJ, Wrightsman RA, Manning JE. Trypanosoma cruzi: protective immunity in mice immunized with paraflagellar rod proteins is associated with a T-helper type 1 response. Exp Parasitol 1996; 84:156-166.

Frank FM, Petray PB, Cazorla SI, Munoz MC, Corral RS, Malchiodi EL. Use of a purified Trypanosoma cruzi antigen and CpG oligodeoxynucleotides for immunoprotection against a lethal challenge with trypomastigotes. Vaccine 2003; 22:77-86.

Dumonteil E (2007) DNA Vaccines against Protozoan Parasites: Advances and Challenges. J Biomed Biotechnol 2007: 90520.

Zuñiga C, Palau T, Penin P, Gamallo C, de Diego JA. Protective effect of Trypanosoma rangeli against infections with a highly virulent strain of Trypanosoma cruzi. Trop Med Int Health 1997; 2:482-7.

Basso B, Cervetta L, Moretti E, Carlier Y, et al. Acute Trypanosoma cruzi infection: IL-12, IL-18, TNF, sTNFR and NO in T. rangeli-vaccinated mice. Vaccine 2004; 22:1868-72.

Basso B, Moretti E, Fretes R. Vaccination with epimastigotes of different strains of Trypanosoma rangeli protects mice against Trypanosoma cruzi infection.Mem Inst Oswaldo Cruz 2008; 103:370-4

Collins MH, Craft JM, Bustamante JM, Tarleton RL. Oral exposure to Trypanosoma cruzi elicits a systemic CD8+ T cell response and protection against heterotopic challenge. Infect Immun 2011; 79:3397-406.

Zuñiga E, Motran C, Montes CL, Diaz FL, Bocco JL, Gruppi A. Trypanosoma cruzi-induced immunosuppression: B cells undergo spontaneous apoptosis and lipopolysaccharide (LPS) arrests their proliferation during acute infection. Clin Exp Immunol 2000; 119:507-15.

Taibi A, Plumas-Marty B, Guevara-Espinoza A, Schöneck R, Pessoa H, Loyens M, et al. Trypanosoma cruzi:immunity-induced in mice and rats by trypomastigote excretory-secretory antigens and identification of a peptide sequence containing a T cell epitope with protective activity. J Immunol 1993; 151:2676-89.

Limon-Flores AY, Cervera-Cetina R, Tzec-Arjona JL, Ek-Macias L, Sánchez-Burgos G, Ramírez-Sierra MJ, et al. Effect of a combination DNA vaccine for the prevention and therapy of Trypanosoma cruzi infection in mice: role of CD4+ and CD8+ T cells. Vaccine 2010; 28:7414-9.

Rottenberg ME, Cardoni RL, Moreno M, Segura EL. Trypanosoma cruzi: Inmune response in mice inmunized with parasite antigens. Exp Parasitol 1988; 6: 101.

De Lima AR, Aparicio A, Berrocal A, Navarro MC, Graterol D, Contreras V. Epimastigogénesis de Trypanosoma cruzi en medio axénico: cambios peptídicos, glicopeptídicos y enzimáticos. Revista de la Facultad de Ciencias de la Salud 2007; 11(2):39-47.

Goicochea MA. Aspectos epidemiológicos de la enfermedad de Chagas en las comunidades de Rumiaco y Nuevo Guayaquil, distrito de Callayuc, provincia de Cutervo, departamento de Cajamarca, diciembre 2005 – abril 2006. Tesis de Biólogo Microbiólogo, Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo. Perú. 2007.

Basombrio MA, Besuschio S and Cossio PM. Side effects of immunization with live attenuated Trypanosoma cruzi in mice and rabbits. Infect. Immun 1982; 36:342-350.

Trischamann T, Bloom B. Genetcs of murine resistence to Trypanosoma cruzi. Infec Inmun 1982; 35: 546-551.

Tarleton RI. Parasite persistence in the etiology of Chagas disease. Int. J. Parasitol 2001; 31: 550-554.

Descargas

Publicado

2015-07-20

Número

Sección

ARTICULOS ORIGINALES