Efecto de antígenos de epimastigota de Trypanosoma cruzi obtenidos a diferentes tiempos de incubación sobre anticuerpos producidos en Oryctolagus cuniculus.
Resumen
La técnica de Western blot es usada para confirmar el diagnóstico de diversas enfermedades parasitarias y está siendo estandarizada para la Enfermedad de Chagas, por ello es necesario resolver algunas interrogantes que permitan su mejor aplicación. Una de ellas es, cuál es el efecto de antígenos de excreción-secreción de epimastigotas de Trypanosoma cruzi cepa C1 aislada de Triatoma infestans de Arequipa (Perú) obtenidos a seis y 18 horas de incubación, sobre anticuerpos producidos en conejo, Oryctolagus cuniculus, mediante la técnica de Western blot. Para ello, se emplearon sueros de conejos inmunizados con preparaciones antigénicas obtenidas a las seis y 18 horas de incubación en medio mínimo esencial (MEM-Eagle Difco), analizándose su reactividad mediante la técnica de Western blot. Se evidenció la presencia de seis bandas reactivas cuando se usaron los antígenos obtenidos a las seis horas de incubación y 15, cuando se usaron los antígenos obtenidos a las 18 horas, estas últimas, además, muestran mejor reactividad. En conclusión, a menor tiempo de incubación se producen menor número de antígenos de excreción-secreción detectados por la técnica de Western blot.
Palabras clave: Western blot, epimastigotes de Trypanosoma cruzi, Oryctolagus cuniculus
Citas
Carod-Artal FJ, Gascon J. Chagas disease and stroke. Lancet Neurol 2010; 9:533-542
Lescure FX, Le Loup G, Freilij H, Dereloux M, et al. Chagas disease: changes in knowledge and management. Lancet Infect Dis 2010; 10:556-570
Nuns MPC, Dones W, Morillo CA, Encina JJ, et al. Chagas diseas Nuns MPC, Dones W, Morillo CA, Encina JJ, et al. Chagas disease: an overview of clinical and epidemiological aspects. J Am College Cardiol 2013; 2(9):767-776
Hunter GC, Barrini.Mayori K, Ancca-Juarez J, Castillo-Neyra R., et al. A field of alternative targeted screening strategies for Chagas disease in Arequipa, Peru. PLoS Negl Trop Dis 2012; 6(1): e1468
Solís H, Huamán A, Ferrer A, Tarqui K, et al. Comunicación preliminar sobre la presencia de Trypanosoma cruzi en departamentos del norte y nororiente del Perú. An Fac med 2012; 73(1): 43-46
Vega CS, Náquira VC. Manual de procedimientos de laboratorio para el diagnóstico de la tripanosmiasis americana (Enfermedad de Chagas). Inst Nac de Salud. Lima. Perú. 2006.
Luquetti AO, Schnmunis GA. Diagnosis of Trypanosoma cruzi infection. En: Telleria & Tibayrenc (eds.), American Trypanosomiasis, Chagas Disease: One hundred years of research. Amsterdam: ELSEVIER, 2010; pp.744-792
Escalante H, Davalois A, Reyes W. Eficiencia de la técnica de electroinmunotransferencia o Western blot para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas en el Perú. Rev Biomédica; 2011; 31: 209-421.
Kesper, N, De Almeida K, Stof A, Umezawa E. Immunoblot analysis of trypomastigote excreted-secreted antigens as a tool for the characterization of Trypanosoma cruzistrains and isolates. J. Parasitol. 2000; 86: 862-867
Berrizbeitia M, Ndao M, Bubis J, Gottschalk M, Aché A, Lacouture S, Medina M, Ward B. Purified excreted-secreted antigens from Trypanosoma cruzi trypomastigotes as tools for diagnosis of Chagas’ disease. J. Clin. Microbiol. 2006; 44:291-296.
Escalante H, Jara CA, Mayhuay R. Antígenos de excreción-secreción de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi detectados por Western Blot usando sueros de pacientes con parasitosis confirmada. REBIOL 2013; 33(2): 67-75
De Souza M, Amato Neto V. Discrepancies and consequenses of indirect haemagglutination, indirect immunofluorescent and ELISA tests for the diagnosis of Chagas disease. Rev Inst Med Trop Sao Paulo 2012; 54(3): 141-143
Zarate-Blades CR, Blades N, Nascimento MS, Silveira JF, et al. Diagnostic performance of tests bases on Trypanosoma cruzi excreted-secreted antigens in an endemic area for Chagas disease in Boliva. Diag Microbiol Infec Dis 2007; 57: 229-232.
Berrisbeitia M, Figueroa M, Ward BJ, Rodriguez J. et al. Development and application of an ELLISA assay using excretion/secretion proteins from epimastigote forms of T. cruzi (ESEA antigens) for the diagnosis of Chagas disease. J Trop Med 2012; ID. 875909.
Moncayo A, Silveira AC. Current trends and future prospects for control of Chagas Disease. En: Telleria & Tibayrenc (eds.). American Tripanosomiasis, Chagas Disease: One hundred years of research. Amsterdam: ELSEVIER 2010; pp.55-82
Bayer AM, Hunter GC, Gilman RH, Cornejo del Carpio JG, et al. Chagas disease, migration and community settlement patterns in Arequipa, Peru. PLoS Negl Trop Dis 2009; 3(2): e567
Delgado S, Castillo-Neyra R, Quispe-Machaca VR, Ancca-Suarez J; et al. A history of Chagas disease transmission, control a reemergence in peri-rural La Joya, Peru. PLoS Negl Trop Dis 2011; 5(2): e970
Frade AF, Luquetti AO, Prata A, Ferreira AW. Western blotting method (TESAcruzi) as a suppmental test for comfirming the presence of anti-Trypanosoma cruzi antibopdies in finger prick blood samples from children aged 0-5 years in Brazil. Acta Tropica 2011; 117: 10-13
Malchiodi L, Chiaramonte M, Taranto N, Zwirner N, Margni R. Cross-reactivity studies and differential serodiagnosis of human infections caused by Trypanosoma cruzi and Leishmania spp; use of immunoblotting and ELISA with a purified antigen (Ag163B6). Rev Clin Exp Immunol 1994; 97(1): 417-423
Riera C, Verges M, Iniesta L, Fisa R, et al. Identification of a Western blot pattern for the specific diagnosis of Trypanosoma cruzi infection in human sera. Am J Trop Med & Hyg 2012. 86(3):412-416.
